埃博霉素B的发酵工艺的分析研究.pdfVIP

STUDIESoNFERMENTATIoNPRoCESSFoR PRoDUCINGEPoTHILoNEB AThesisSubmittedto and Shaanxi ofScience University Technology for of inPartialFulfillmentofthe the Degree Requirement Masterof 娶望gi旦曼竺￡i望g Thesis Guo--li Supervisor：ProfessorGong 一■■———————————————●■■■●■■■■●●■■●■■■■■■●- 2014 May 埃博霉素B的发酵工艺研究 摘要 B)是粘细菌纤维堆囊菌产生的大环内酯类次 埃博霉素B(Epothilone 级代谢产物，是一种新型的抗肿瘤药物。其作用机制与紫杉醇相同，通过促 微管聚合作用从而抑制肿瘤细胞的增殖，并且与紫杉醇相比，埃博霉素具有 水溶性更好，可以通过微生物发酵生产等优点，因此埃博霉素被誉为最具有 潜力的抗肿瘤新药之一。然而埃博霉素B发酵产量较低且不稳定，为了提 高埃博霉素B产量，本文对埃博霉素B发酵工艺进行研究。 以纤维堆囊菌(Sorangium 酵培养基和发酵条件进行优化，然后开展了基于生物合成途径的埃博霉素B 发酵工艺优化研究，最后在5L发酵罐上建立菌株的分批发酵动力学模型。 主要的研究结果如下： B产量有显著影响的三个因素为马铃薯淀粉，脱脂奶粉和无水氯化钙。然后 应面分析法进行回归分析，确定重要因素的最优浓度，最终得到最佳发酵培 (TE)O．5mL／L，VB】2 O．5mg／L。在此最优条件下发酵埃博霉素B的产量为 29．95mg／L，发酵产量比优化前提高了1．1倍。 (2)采用单因素试验和正交试验设计，对产埃博霉素B的发酵条件进 条件下，埃博霉素B的产量为35．24mg／L，比优化前提高了17．67％。 (3)根据已知的埃博霉素B的合成途径，采用单因素法考察了前体物 质、一氨基酸类以及辅酶生物素对埃博霉素B合成的影响，然后通过 明：丙酸钠，L一异亮氨酸，L一甲硫氨酸三个因素对埃博霉素B产量有显著影 量比优化前提高了38．29％。 (4)建立了菌株在5L发酵罐中的细胞生长、产物生成以及基质消耗 的动力学模型。 关键词：埃博霉素B；纤维堆囊菌；发酵优化；响应面法；发酵动力学 oNFERMENTATIoNPRoCESSFoR STUDIES EPoTHILoNEB PRoDUCING ABSTRACT whichare metabolites the Epothilones secondary naturallyproducedby attentionin