实时荧光定量聚合酶链反应快速检测产毒铜绿微囊藻徐恒李继影.doc

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实时荧光定量聚合酶链反应快速检测产毒铜绿微囊藻徐恒省李继影刘孟宇景明苏州市环境监测中心站江苏苏州摘要以铜绿微囊藻产毒株微囊藻毒素合成酶基因为靶序列设计了一对特异性引物运用实时荧光定量聚合酶链反应方法对铜绿微囊藻进行了定性定量检测结果表明仅含铜绿微囊藻脱氧核糖核酸模板的样品有扩增对照组小球藻没有检测到扩增信号扩增产物熔解曲线平稳峰尖且窄熔解温度为证明该扩增产物极为特异以重组质粒为标准品所得标准曲线具有高度线性相关重复性好符合制备实时定量标准曲线的要求利用该方法建立的标准曲线对实验室培养获得的铜绿微

实时荧光定量聚合酶链反应快速检测产毒铜绿微囊藻 徐恒省,李继影,刘孟宇,景明 (苏州市环境监测中心站,江苏 苏州 215004)摘 要:以铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)产毒株微囊藻毒素合成酶基因(mcyA)为靶序列设计了一对特异性引物,运用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)方法,对铜绿微囊藻进行了定性定量检测。结果表明,仅含铜绿微囊藻脱氧核糖核酸(DNA)模板的样品有扩增,对照组小球藻(Chlorella)没有检测到扩增信号;扩增产物熔解曲线平稳,峰尖且窄,熔解温度为83±1℃,证明该PCR扩增产物极为特异。以重组质粒pMD-18T-mcyA为标准品,所得标准曲

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