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2014-腓肠肌
蟾蜍骨骼肌兴奋与收缩实验;实验目的:
掌握蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法
观察阈刺激、阈上刺激和最大刺激;及刺激强度、频率对肌肉收缩的影响
探究神经、骨骼肌兴奋的电变化与肌肉收缩的关系
;实验原理
青蛙和蟾蜍是两栖类动物,其坐骨神经和腓肠肌属于可兴奋组织,把它们置于人工配制的任氏液中,其兴奋性在几个小时内保持不变
神经组织的兴奋表现为动作电位,肌肉组织的兴奋主要表现为机械收缩;若给坐骨神经一个适宜的刺激,可在神经和肌肉上产生一个可传导的动作电位,肌肉发生收缩和舒张一次
一个刺激是否能发生组织兴奋,不仅与刺激形式有关,还与刺激频率、强度、及频率-强度变化率三要素有关;实验方法和步骤:;二、制备坐骨神经-腓肠肌标本
剥制后肢标本: 轻提双毁髓蛙,自背面上肢下面横向剪断脊柱。轻轻托起后肢,看清坐骨神经位置,沿脊柱两侧纵向剪断体壁至耻骨联合处,去除断口以上肢体和内脏放入污物缸。剥去后肢皮肤后放入任氏液中备用。
;分离两后肢: 用镊子从背部夹住脊柱将标本提起,然后沿正中线用剪刀将脊柱分为两半并从耻骨联合中央剪开两侧大腿,这样两腿即完全分离。将两条腿浸于盛有任氏液的容器中。
*注意不要剪断脊柱两侧的坐骨神经!!!
;游离坐骨神经:将后肢标本脊柱端腹面向上,趾端向外侧用蛙钉将标本固定在蛙板上。先在腹腔面用玻璃分针沿脊柱游离坐骨神经,然后在标本的背侧于股二头肌与半膜肌的肌肉缝内将坐骨神经与周边的结缔组织分离直到腘窝,但不要伤及神经,其分支待以后用手术剪剪断肌肉。 ;分离股骨头:捏住股骨,剪去并刮净周围肌肉,保留股骨的后1cm,剪断股骨
游离腓肠肌:同样用玻璃分针将腓肠肌与其下的结缔组织分离并在其跟腱处穿线、结扎 ;三、实验结果:检查标本 用经过任氏液湿润的锌铜弓迅速接触坐骨神经,如腓肠肌发生一次明显而灵敏的收缩,则表示标本的兴奋性良好,即可将标本放在盛有任氏液的器皿中备用。;实验系统连接和参数设置
张力换能器输入RM6240系统第一通道,刺激输出接标本盒刺激电极
开启计算机和RM6240的电源
启动RM6240,点击“实验菜单”,选择“刺激强度对骨骼肌收缩的影响”
在“选择”下拉菜单中选择“强度/频率”项,显示刺激参数;实验装置连接
将坐骨神经腓肠肌标本的股骨插入标本盒的固定孔,旋转固定螺丝固定标本,腓肠肌跟腱的扎线固定在张力换能器悬臂梁上,不宜太紧,此连线应与桌面垂直,调节微距调节器,将前负荷调至2.0g
把穿好线的坐骨神经轻轻提起,放在刺激电极上,应保证神经与刺激电极接触良好
;观察项目----刺激强度
从0.2V逐渐增大刺激强度(0.05V),找出刚能引起肌肉出现微小收缩的刺激强度(阈强度)。继续增强刺激强度,观察肌肉收缩反应
继续增强刺激强度,直至肌肉收缩曲线不能继续升高为止。找出刚能引起肌肉出现最大收缩的最小刺激强度,即最大刺激强度
;;刺激频率;;实验结果;注意事项
制备双毁蟾蜍时,避免蟾酥溅入眼内
标本制备及实验操作过程中,适时滴加任氏液,以防标本干燥而丧失正常生理活性,同时避免强力牵拉神经和肌肉
每次刺激之后必须让肌肉有一定的休息时间
找准最大刺激强度,不能刺激过强而损伤神经
实验过程中保持换能器与标本连线的张力不变
;思考题
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