血清胸苷激酶1对胃肠癌患者诊断价值.docVIP

血清胸苷激酶1对胃肠癌患者诊断价值摘 要 目的：探讨血清胸苷激酶1(TK1)对胃肠癌患者的诊断价值。方法：应用免疫印迹增强化学发光方法，检测59例胃肠癌患者和32名健康体检者血清TK1(sTK1)浓度；分析该方法的灵敏度，并比较sTK1在两种人群中的差异。结果：胃肠癌患者和健康体检者sTK1值分别为2.07±1.14pmoL/L和0.88±0.64pmoL/L，前者sTK1水平显著高于后者(P＜0.01)。胃肠癌患者和健康体检者sTK1阳性率分别为54.24%和6.25%，前者阳性率显著高于后者(P＜0.01)。sTK1测定灵敏度为54.24%，特异度为93.75%，诊断符合率为68.13%。ROC曲线分析，曲线下面积为0.792，95%可信区间为(0.700，0.884)。结论：sTK1测定值对胃肠道肿瘤具有较好的诊断价值。 关键词 胸苷激酶1 胃癌 肠癌 诊断 胸苷激酶1(TK1)是一种存在于细胞质中的激酶，其含量与细胞的增殖程度相关［1］。非增殖细胞和健康人血清中TK1(sTK1)浓度极微或检测不到，而肿瘤患者sTK1水平可显著升高，可达2～100倍［2］，因而被国际公认为肿瘤细胞增殖动力的指标。本文采用免疫印迹增强化学发光法检测胃肠癌患者sTK1水平，同时与健康对照人群比较，以期探讨sTK1对胃肠癌患者的诊断价值。 资料与方法 一般资料：2009年3月～2011年1月收治胃肠癌患者59例和32例健康体检者。胃肠癌患者中，胃癌27例，结肠癌13例，直肠癌19例；男40例，女19例，年龄40～80岁，平均63.9±11.9岁。健康体检者中，男21例，女11例，年龄36～79岁，平均61.6±15.0岁。 入选标准：所有入选者排除黄疸、病毒感染、胃溃疡或胃出血、感染或炎症、女性月经期等，同时排除脂血、溶血等因素；胃肠癌患者皆为病理确诊，健康体检者排除肿瘤。所有患者签署知情同意书。 标本收集：清晨空腹抽取静脉血2ml，室温静置1小时后，4000r/分，离心5分钟；取上层血清200μl，置-20℃冰箱保存待检。 标本检测：利用抗人TKl单克隆抗体、免疫印迹增强化学发光法检测sTK1水平。人sTKl试剂盒及CSI-1型化学发光成像分析仪均由深圳华瑞同康公司提供。检测步骤按照试剂盒说明书进行。主要步骤包括：含硝酸纤维素膜的模板上分别加入标准品和待测样品，室温下自然晾干；洗膜后加入封闭液，室温下振摇封闭1小时；加入一抗，4℃过夜；洗液漂洗后加入二抗，室温下振摇反应40分钟；洗液漂洗后加入酶复合物，室温下振摇反应1小时；洗液漂洗后加入ECL发光试剂，精确反应1分钟后上机检测。 TK1参考值：＜2pmoL/L为阴性，＞2pmoL/L为阳性。 统计学方法：计量资料采用X±S表示，两样本间比较采用student’s t检验，计数资料采用X2检验，采用SPSS16.0统计软件分析，P＜0.05为差异有统计学意义。 结 果 各组sTK1测定值：胃肠癌患者sTK1水平0.28～4.23pmoL/L，平均2.07±1.14pmoL/L；健康体检者sTK1水平0.21～2.92pmoL/L，平均0.88±0.64pmoL/L。两组比较，sTK1水平显著高于健康体检者(P＜0.01)。以sTK1＞2pmoL/L为阳性标准，胃肠癌患者sTK1阳性32例(阳性率54.24%)，阴性27例；健康体检者sTK1阳性2例(阳性率6.25%)，阴性30例。胃肠癌患者阳性率显著高于健康体检者(P＜0.01)。 sTK1检测灵敏度：本组所有91例资料中，sTK1测定灵敏度为54.24%，特异度为93.75%，阳性预测值为94.12%，阴性预测值为52.63%，假阳性率为6.25%，假阴性率为45.76%，诊断符合率为68.13%。ROC曲线分析，曲线下面积为0.792，95%可信区间为(0.700，0.884)，经检验P＜0.01。结果表明，sTK1测定值对胃肠道肿瘤具有较好的诊断价值。 讨 论 Weissman等［3］于1960年证实TK是胸腺嘧啶核苷合成DNA的关键酶。TK有TK1和TK2两种同工酶，TK1的水平与细胞周期中的S期和DNA合成密切相关，TK1被称为是S期的特殊酶。正常细胞在G1期死亡，此时，释放到血清中的TK1水平很低或不可检测；肿瘤细胞增殖和凋亡均失控，在对数生长期，大量肿瘤细胞处于S期和G2期，部分细胞在S/G2期坏死，细胞破裂后，在细胞质内的高浓度的TK1释放到外周血。因此，一旦有肿瘤生长和增殖，患者血清TK1水平可升高2～100倍［2］。 目前，TK1不仅应用于肿瘤的疗效判断和预后指标，亦是肿瘤筛查和诊断的良好标志物［4~6］。TK1可单独或联合应用于肿