毛细管电泳电化学发光检测麻黄碱类药物与检测器的改进的分析研究.pdfVIP

摘 要 毛细管电泳(CE)，又称高效毛细管电泳(HPCE)是一类以电场为驱动力，以 毛细管为分离通道，以样品的多种特性(电荷、大小、等电点、亲和行为、相分配 特性等)为根据的高效分离分析技术。是继气相色谱(GC)和高效液相色谱(HPLC) 之后分析科学的又一重大进展，使分析科学得以从微升水平进入纳升水平，并使单 细胞、乃至单分子分析成为可能。毛细管电泳具有分离模式多、分离效率高、分析 速度快、耗样量少、仪器简单等特点，已被用于蛋白质分离、糖分析、手性分离、 DNA测序、单细胞分析及疾病早期诊断等。但作为其分离通道的毛细管内径尺寸 测灵敏度一直成为毛细管电泳领域的重要研究方向之一。 电化学发光(ECL)具有灵敏度高、线性范围宽、反应可控性强、试剂耗量少、 获得分析信息多和反应效率高等优点。毛细管电泳与电化学发光的结合，兼备了 CE高分离效率和ECL高灵敏度的优点，可用于复杂样品中痕量组分的分离和测定。 本文利用CE．ECL联用技术，开展了两种重要麻黄碱的分析检测；并结合 CE．ECL联用技术的相关原理，开展对其检测器的改进研究；主要研究内容和创新 点如下： 1．利用毛细管电泳电化学发光首次建立一种测定一对非对映异构体盐酸麻黄 碱和盐酸伪麻黄碱的新方法。对电泳缓冲液类型、毛细管电泳分离条件、电化学发 V；进样电 光检测条件的影响进行了系统研究。在优化实验条件下：检测电位，1．2 mmol／L kV；电泳缓冲溶液选择，15 压，10kV；进样时间，10s；分离电压12 mmol／L 7．4；电化学发光溶液，5 mmol／L磷酸 phosphate-borax，pH Ru(bpy)32+于50 min内获得良好的分离。盐酸麻黄碱和盐 8．5，两种差向异构体麻黄碱在5 盐，pH x10。8mol／L和5．2×10一mol／L。盐酸麻黄碱和伪麻 酸伪麻黄碱的检出限分别为4．5 黄碱在三个不同浓度水平的加标回收率在89．6％～103．4％范围内，相对标准偏差 (RSD)不大于5．3％。在尿样中，盐酸麻黄碱和伪麻黄碱的定量限分别为：6．9×107 mo儿和7．7×10～mol／L。将所提出的方法成功应用于人尿样中盐酸麻黄碱和盐酸伪 麻黄碱的测定和呋麻滴鼻液中盐酸麻黄碱含量分析，并对盐酸伪麻黄碱在人体内的 药代动力学进行了研究。提出的方法在药物治疗监测和临床分析方面有潜在的应 用。 2．通过对CE．ECL检测器的改进研究，研制了一套新型的CE．ECL检测系统。 在传统的CE．ECL检测系统中，其检测对象一般是电化学发光共反应试剂。本新型 装置不仅可用于电化学发光共反应试制的检测，更重要的是可检测ECL发光体及其 标记物，并有望应用于蛋白质大分子生物活性物质的检测及免疫分析。拓宽了 CE．ECL的应用范围，功能更全面。 关键词：毛细管电泳；电化学发光；麻黄碱；尿样分析；药代动力学；检测器 II Abstract Capillaryelectrophoresis(CE)，namelyhighperformancecapillaryelectrophoresis a efficientmeansof is in tube (HPCE)is separation，which highly performedcapillary and drivenelectricfiel