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临床免疫重点
交叉反应(cross-reaction):抗体对具有相同或相似抗原表位的抗原发生的反应称为交叉反应。
盐析现象:在高浓度电解质存在的条件下,电解质可先与抗体分子结合,排斥掉水分子,从而使抗体优先沉降的现象。
滴度(titer):可出现明显的肉眼课件的抗原抗体反应的抗体最高稀释度。
佐剂(adjuvant):同Ag一起或预先注入机体,能增强机体对该Ag的免疫应答或改变免疫应答类型的物质(多用于可溶性抗原)。
试血:末次Ag注射后,测定血清中Ab的效价,叫试血。试血:可溶性Ag:用双扩(梅花孔型);颗粒性Ag:用直接凝 集试验(试管法)
免疫标记技术:用可以微量检测的标记物(示踪物质)标记抗原或抗体,作为试剂,与相应抗体或抗原结合反应后,测定抗原抗体复合物中的标记物,从而推断所测抗体或抗原有无及量的多少。特点:高特异性,高灵敏度
包被(coat):将抗原或抗体吸附在故乡载体上的过程。又称固相化或吸附。包被后不能被洗脱,缓冲液:pH9.6CB。洗涤(wash)pH7.2-7.4PBS液
单克隆抗体(McAb):由一个B细胞克隆产生的识别单一抗原表位的同源抗体。
人源单克隆抗体:单克隆抗体为人IgG。目的:用于人
基因工程制备单抗:在基因水平上对编码抗体的基因进行切割、拼接或修饰,甚至人工合成,然后导入受体细胞内表达而产生的抗体(单克隆抗体)。
嵌合抗体:用DNA 重组技术将鼠源单抗基因的可变区(V区)基因与产生人Ig的恒定区(C区)基因相连接,构成嵌合基因,导入受体细胞(骨髓瘤细胞),表达出嵌合抗体。
补体(complement):补体是存在于人和动物血清中的一组具有酶活性的球蛋白,一般情况下处于未激活状态。
免疫复合物(immune complex,IC):它主要指AgAb复合物及AgAbC复合物两种。
ANA:原指抗细胞核抗原成分的自身抗体的总称。 ANA广义地指抗细胞内所有抗原成分的自身抗体的总和。
ENA抗原:是指可用盐水或PBS从细胞核中提取的Ag
超敏反应(hypersensitivity):变态反应(allergy),指机体受到某些抗原刺激时,出现以生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的异常适应性免疫应答。
移植物抗宿主反应:多发生在骨髓移植中,移植物中免疫活性细胞攻击宿主,表现:宿主的淋巴系统、造血系统、单核吞噬系统、皮肤、消化道、肝脏等均受到损伤,出现:皮疹、腹泻、消化不良、血细胞减少、肝脾肿大、肝功受损等全身情况下降,易继发感染死亡。
抗原抗体反应的原理:当抗原表位与抗体Fab段在静电引力,范德华力与氢键结合力的作用下由于其所带电荷及其化学空间结构等而特异性靠近时,相互间,正负极性消失;又由于疏水作用力,周围的亲水层丢失,排斥了两者之间的水分子,而使得抗原抗体互相吸引并紧密结合。疏水作用力静电引力氢键范德华力
抗原抗体反应的特点:1.特异性2.比例性3.可逆性
抗体分型:R型抗体:以家兔免疫血清为代表,有较宽的抗原抗体合适比例范围,只有在Ag过剩时,才出现可溶性抗原抗体复合物。大多数小动物的免疫血清属于该类型。H型抗体:以马免疫血清为代表,抗原抗体合适比例范围较窄,在Ag、Ab过剩时,都可出现可溶性抗原抗体复合物。人和多数大动物的免疫血清属于该类型。
影响抗原抗体反应的主要因素:自身:Ag:与Ag的理化性质、抗原表位的数目及种类有关。Ab:与Ab的来源有关:是R 型抗体或H型抗体;特异性、亲合性有关;浓度有关。 外界:1.电解质:一般是生理盐水(0.9% NaCl),浓度过高,会使Ab蛋白质优先沉降而出现盐析现象。2.PH:一般为PH 6-8,当PH3时,可出现颗粒性的 非特异性凝集,称酸凝集。3.温度:抗原抗体反应的常用温度为37°C。因为温度过高,Ag、Ab分子运动速度加快,容易发生分解;温度过低,Ag、Ab分子运动速度减慢,从而不容易形成抗原抗体复合物。
抗原抗体反应分哪些种类:分5大类:沉淀反应;凝集反应;补体参与的溶血反应、补体结合试验;中和试验;三大标记技术。
交叉反应有无特异性,为什么?在临床上有何意义:有特异性,并没有违背Ag、Ab特异性结合的原则,其产生的先决条件是存在共同Ag表位。意义:1. 免疫学诊断:外斐实验 2.可造成免疫病理损害。
双扩、单扩、对流免疫电泳、免疫电泳实验的原理,方法,用途。
双扩:在琼脂内抗原和抗体在凝胶中不同孔内各自向四周扩散,彼此在相遇处特异性结合,形成白色沉淀线。方法:制备琼脂板(3ml 1.5%NS琼脂)打孔(双孔型/三角孔型/梅花孔型)加样(平孔沿)扩散(37C、24 h观察结果)用途:1.已知Ag或Ab测未知Ab或Ag :双孔型2.抗原性质分析:三角孔型3.测Ag有效稀释度:梅花孔型
单扩:定量试验,用已知抗体测定未知抗原,抗体与凝胶混合,不会再扩散,仅抗原从
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