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第14章 原核生物基因的表达调控 重点：操纵子的结构特点和功能； 乳糖操纵子的正负调控； 色氨酸操纵子的衰减作用。 难点：色氨酸操纵子的衰减作用。 第一节 基因调控的基本定律 一、基因调控水平 二、基因和调控元件 三、DNA结合蛋白 一、基因调控水平 基因表达的调控可以发生在DNA到蛋白质的任意节点上，如基因结构、转录、mRNA加工、RNA的稳定性、翻译和翻译后修饰。 二、基因和调控元件 基因：是指能转录成RNA的DNA序列。 结构基因：编码代谢、生物合成和细胞 结构的蛋白质。 调节基因：产物是RNA或蛋白质，控制 结构基因的表达。其产物通常是DNA 结合蛋白。 调控元件：不能转录但是能够调控基因 表达的DNA序列。 三、DNA结合蛋白 调控蛋白通常含有与DNA结合的结构域，一般由60-90个氨基酸组成。在一个结构域中，只有少数氨基酸与DNA接触。这些氨基酸（包括天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、赖氨酸和精氨酸）常与碱基形成氢键，或者与磷酸核糖骨架结合。 根据DNA结合结构域内的模体，可以将DNA结合分成几种类型（图16.2）。 第二节 大肠杆菌的乳糖操纵子 一、操纵子结构 二、正负调控 三、乳糖操纵子 四、lac突变 五、正控制 一、操纵子结构 原核和真核生物基因调控的主要差异在于功能相关的基因的组成。细菌的功能相关的基因常常排列在一起，并且由同一启动子控制。 一群一起转录的细菌的结构基因（包括其启动子和控制转录的额外序列）称为操纵子。 二、正负调控 转录水平上的调控主要有两种类型： 负调控：gene ON 阻遏蛋白 OFF 正调控：gene OFF 激活蛋白 ON 诱导： 活性阻遏蛋白? 失活 诱导因子＋ 非活性激活蛋白? 活性 阻遏： 失活阻遏蛋白? 活性 共阻遏蛋白＋ 活性激活蛋白? 失活 三、乳糖操纵子 乳糖操纵子是诱导型操纵子，当诱导物不存在时，阻遏蛋白结合到操纵序列上并阻止转录；当诱导物存在时，阻遏蛋白与诱导物结合后失去活性，转录才得以进行。 四、lac突变 为了鉴定乳糖操纵子各个成分的功能， Jacob和Monod做了细菌的接合实验，其中供体菌的F’因子上也带有乳糖操纵子。通过观察带有不同突变的细菌染色体和F’因子形成的部分二倍体，他们发现乳糖操纵子具有顺式作用（控制同一条DNA分子上基因的表达）和反式作用（控制其它DNA分子上基因的表达）。 1、结构基因的突变 Jacob和Monod发现有些菌株不能合成β-半乳糖苷酶或渗透酶。这些突变是因为结构基因lacZ和lacY编码的酶的氨基酸序列发生了改变而引起的。 部分二倍体lacZ+lacY-/F’ lacZ-lacY+的功能是正常的：在乳糖存在时，能产生β-半乳糖苷酶和渗透酶。这说明lacZ和lacY的功能是独立的，即使不连锁也能正常表达。 2、调节基因的突变 Jacob和Monod进一步发现有些突变能同时影响β-半乳糖苷酶和渗透酶的合成。这是因为编码这两种酶的基因位于同一操纵子内，并被协同调控。 有些突变是组成型的，无论乳糖存在与否，都能合成乳糖代谢相关的酶。这些突变可分为两种类型：调节基因突变型和操纵序列突变型。调节基因的突变型可表示成lacI-（图16.9）。 还有一类调节基因的突变型称为超阻遏突变体，表示成lacIs。 3、操纵序列突变 Jacob和Monod发现另一类组成型突变位于lacZ附近的操纵序列内，这种突变表示成Oc（O表示操纵序列，c代表组成型突变）。这种突变型的操纵 序列发生了改变，使得阻遏蛋白不能和操纵序列结合。 4、启动子突变 这种突变类型的启动子序列发生了改变，称为lacP-,其RNA聚合酶不能与启动子结合。无论乳糖存在与否，lacP-突变体都不能产生乳糖代谢相关的酶。 与操纵序列突变类似，启动子突变也是顺式作用，仅影响同一条DNA上的基因。部分二倍体lacI+ lacP+ lacZ+/lacI+ lacP- lacZ+能产生β-半乳糖苷酶，而lacI+ lacP- lacZ+/lacI+ lacP+ lacZ-不能产生β-半乳糖苷酶。 习题1：在诱导型操纵子中，调节基因的产物是阻遏蛋白。遗传学家分离到几种乳糖操纵子的突变体。这些突变分别发生在哪个部位？这些突变又是如何影响结构基因的表达的？ 菌株的基因型为 、 解：（a）所有的基因序列正常，所以该操纵子功能正常：当乳