四川省岳池县第一中学高中生物-专题5-课题2-多聚酶链式反应扩增DNA片段学案-新人教版选修1.docVIP

多聚酶链式反应扩增DNA片段 学习目标1．了解PCR技术的基本操作 2．理解PCR的原理 3．讨论PCR的应用 学重点学点 课前预习 使用说明与学法指导 据学习目标，认真预习课本，用红笔标注重点与难点15分钟完成课前预习内容。 知识准备 教材助读） 变性：在 ℃时DNA解旋 复性：在 ℃时引物与DNA单链结合 延伸：在 ℃时合成DNA子链（两个引物间的序列） 三、实验操作 在实验室中，做PCR通常使用 ，它是一种薄壁塑料管。具体操作时，用微量移液器，按PCR反应体系的配方在 中依次加入各组分，再参照课本P62表的设置设计好PCR仪的循环程序即可。 四、操作提示 （1）、为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的 、 、 以及蒸馏水等在使用前必须进行 。 （2）、PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在 储存。使用前，将所需试剂从冰箱拿出，放在冰块上缓慢融化。在微量离心管中添加反应成分时，移液管上的枪头要 。 预习自测题 1．DNA的3’端是（ ），5’是（ ） A．羟基末端 B．磷酸基团的末端 2. PCR的反应过程叙述正确的是（ ） A．延伸-----变性----- 复性 B．延伸----复性------ 变性 C．变性-----复性----- 延伸 D．变性-----延伸----- 复性 我的疑问 学始于疑课内探究探究一 （3）第一轮循环之后的结果是什么？ （4）细胞内DNA复制和细胞外PCR扩增的比较 DNA复制 PCR扩增 不同点 场所 能量 酶 是否需要加入引物 是否需缓冲液 设备 相同点 原料 复制原理 模板 引物 探究二请将学习总结写在下面 - 5 - 变性 复性 延伸 多聚酶链式反应扩增DNA片段 PCR原理 DNA的复制需要酶、原料、能量、引物 DNA的变性和复性受温度影响 PCR过程 变性 复性 延伸 操作步骤 配制PCR反应体系 移入离心管 放入PCR 设置工作参数 DNA扩增 测定含量 稀释 调零 测定并读数 计算