第二章植物组织培养基本技术本章学习目标.PDFVIP

第二章 植物组织培养基本技术 本章学习目标 1.掌握植物组织培养技术中的培养基成分及常用培养基的配方。 2.掌握培养基母液的配制及培养基的制备方法。 植物组织培养是一项技术性很强的工作。为了确保组培工作的顺利进行，除 了具备基本的实验设备条件，还要熟练掌握植物组培的基本技术，包括培养基的 配制、外植体的选择与处理、无菌操作技术以及环境条件控制等。 第一节 培养基的基本成分 培养基是根据植物的需求，人共配制的含有各种营养成分的营养物质。培养 基是植物组织培养的核心，也是决定植物组织培养成败的关键因素之一。外植体 之所以能沿着不同的组培途径生长、分化，其主要原因就在于培养基中的物质成 分对细胞的生长发育起着定向调控作用。 在离体培养条件下，不同种植物的组织对营养的要求不同，甚至同一种植物 不同部位的组织对营养的要求也不相同。因此，在进行植物组织培养时，首先必 须找到一种合适的培养基，培养才有可能成功。 一、培养基的无机成分 培养基的基本成分主要包括以下几大类： （一）水分 水分是离体植物生长所必须的主要成分。在培养基制备过程中所用的水必须 是蒸馏水或超纯水，以免水中杂质以及所含矿质离子对培养结果产生影响。 （二）无机养分 指在植物生长发育中所必须的各种矿质元素、无机盐等。根据植物对矿质元 素吸收量的多少，又将无机养分分为大量元素和微量元素两大类。 1.大量元素 植物所需浓度大于0.5mmol/L的元素。主要有：氮、磷、钾、钙、镁、硫、 碳及来源于水中的氢和氧。 2.微量元素 植物所需浓度小于0.5mmol/L的元素。主要有：铁、锰、锌、铜、硼、碘、 钼和钴等。 3.各种元素的生理作用及缺乏时的表现如下 1 N NH4+ NO3- （）氮： 以 和 的形式被吸收，用于生产蛋白质和叶绿素 等，在干物质中含量约为 1-2%。缺乏氮素时老叶首先变黄，氮过量，枝叶 会过度茂盛。 2- 4- （2）磷： P 以HPO4 和H2PO 离子形式吸收，用于生成磷脂、磷酸 化合物等。在干物质中约占0.2%。缺乏P 时，植株生长缓慢，老叶暗紫色。 3 K K+ K+ （）钾： 以 形式吸收，在植物体内， 用于控制气孔开放， 1% 一些激酶的活化剂等。占干物质的 。缺乏时，叶尖、叶缘枯焦，叶片皱 曲状，老叶发黄或出现死斑。 2- （4）硫： S 以SO 离子形式吸收，主要影响蛋白质的合成。占干物4 质的0.1%。缺乏时幼叶出现浅绿色，进而变白。 2+ （5）镁： Mg 以Mg 形式吸收，是叶绿素必不可少的成分，众多激 酶的活化剂。占干物质的0.2%。缺乏时植物叶片边缘和中央部分缺绿变白。 6 Ca Ca2+ （）钙： 以 形式吸收，游离存在于植物体内，钙能促进幼根 生长。占干物质的0.5%，缺乏时嫩叶失绿，叶缘向上卷曲，出现白色条纹， 顶芽死亡。 2+ 3+ （7）铁： Fe 以Fe 、Fe 形式吸收，用于合成细胞色素、Fd、过氧 化氢酶，对叶绿素的合成和延长生长起重要作用。在干物质中占0.01%。缺 乏时幼叶缺绿。 3- 2- （8）硼： 以BO 或者 O 形式吸收，促进花粉的萌发和花粉管 3 4 7 的伸长，占干物质0.002%。缺乏时叶缘向上卷曲黄花，变厚变脆。顶芽死 亡，花粉无法萌发或者无法形成花粉管。 2+ （9）铜：