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病毒学复习资料 病毒的壳体结构 1.壳体对称： 立体对称(二十面体对称)：动物DNA病毒中，除痘病毒外，其余的都为二十面体对称，并且呈二十面体对称的病毒多无囊膜。 2、螺旋对称：为有囊膜的病毒，在动物病毒中螺旋对称的病毒均属有囊膜的单股RNA病毒。 3、复合对称壳体： 1）由二十面体对称和螺旋对称两部分组成，如有尾噬菌体：头部呈二十面体对称，尾部呈螺旋对称。 2）不规则的二十面体结构：-偶数噬菌体，由两个半个二十面体通过一短六棱柱连接形成。 3）逆转录病毒 包膜内有一个二十面体对称的壳体，壳体内还有由病毒RNA与蛋白质结合形成的，可能为螺旋对称的核糖核蛋白核心。 4）呼肠孤病毒：有两层壳体，内壳体和外壳体均为二十面体对称 5）痘病毒:壳无明显的对称形式 2．囊膜:病毒出芽时从宿主细胞膜（细胞浆膜或核膜或高尔基体膜）获得 囊膜由脂双层和蛋白质构成，并至少含有一种与病毒吸附有关的病毒编码蛋白 有囊膜病毒释放时不用杀死细胞，所以常常能形成持续感染 有囊膜的病毒只有在囊膜完整时才具有感染性，破坏囊膜的试剂能降低病毒的感染性，所以囊膜是抗病毒的药物靶标 3．病毒蛋白质的分类 根据是否存在于病毒粒子中分为： 1)结构蛋白:构成一个完整的、形态成熟的病毒颗粒所必需的蛋白质。 壳体蛋白、包膜蛋白、存在于病毒体中的酶 2）非结构蛋白 由病毒基因组编码，但并不结合于病毒颗粒中的蛋白质。在病毒的复制和增殖过程中发挥一定的作用。 主要是酶类 4.病毒蛋白质的功能 (1)构成病毒衣壳和囊膜的重要成分 (2)具有保护病毒核酸的作用 (3)参与病毒的吸附与侵入，决定病毒对宿主和组织的嗜性 (4)构成病毒的表面抗原，能刺激机体对相应病毒产生免疫应答反应 (5)构成病毒的血凝素，病毒具备血凝特性 (6)构成病毒的酶类，如逆转录病毒的逆转录酶，-RNA病毒和呼肠孤病毒的RNA聚合酶，正粘病毒和副粘病毒的神经氨酸酶等。 5.化学灭活剂 酶类、蛋白变性剂、氧化剂、酸、碱 、其它化学试剂：福尔马林和亚硝酸等 6、保护剂：能够减轻病毒保存过程中其他理化学因子对病毒的损伤，从而保持病毒的感染性、抗原性等生物活性的物质。 甘油 二甲基亚砜(DMSO)：减少冷冻过程中微小冰晶的形成 病毒冻干用保护剂： 低分子物质（5%-10%的糖类、5%谷氨酸钠）：使干燥样品中的最终水分含量不致过低，可防止蛋白质的变性。 高分子物质（血清、明胶、白蛋白）：促进病毒制品在冻干过程中的升华干燥，当冻干的病毒加水复原时，可提高溶解性。 7.病毒的保存 （一）病毒的短期保存 直接置-30℃冰箱中保存 悬浮于50%甘油盐水中，再置-30℃冰箱中保存 （二）病毒的长期保存 1、快速低温冻存 于病毒悬液内加入灭活的动物血清或其他蛋白质保护剂和5%-10%的DMSO，迅速置-70℃或-196℃保存。 含病毒的组织材料可以直接低温冰冻保存；或先浸入50%甘油生理盐水中，再低温保存。 2、冷冻干燥：加入保护剂，在真空条件下使冰冻的病毒悬液脱水。 1）、用保护剂（脱脂牛奶、明胶、灭活的正常动物血清、饱和蔗糖溶液等）将病毒液作1-5倍的稀释。 2）、分装安瓿或青霉素瓶，每支0.5-2mL。 3）、放入事先预冷的-30℃—-40℃酒精中冻结1-2h，或于-70℃冰箱中冻结4h以上。 4）、置于冻干机内，冷冻干燥。 5）、抽真空并封瓶，置-20℃以下低温保存。 8.病毒的复制过程： 吸 附：病毒与细胞表面特异性受体发生碰撞，病毒附着于细胞受体而引起的病毒感染的第一阶段。 1、可逆吸附：病毒与细胞以静电引力相结合。 特点：是一种非特异性的吸附 与细胞和病毒的浓度成正比 与溶液中的Ca2+、Mg2+和Na+等离子有关 单纯的稀释或冲洗都可使病毒重新解脱。解脱的病毒具备感染性。 2、不可逆吸附：病毒表面的蛋白（病毒吸附蛋白,VAP）与细胞膜表面特定蛋白（细胞受体）的特异性结合。 特点：是特异性的吸附 通过外力作用使病毒解吸，病毒不再具备感染性 细胞表面的特定受体决定了细胞对病毒的易感性 不同病毒完成吸附所需时间不一样，但大多数病毒可以在1h之内完成吸附过程 侵入：病毒不可逆地吸附于细胞受体后，病毒以核酸或核衣壳或病毒颗粒等形式，通过不同方式进入细胞的过程。 侵入方式： 注射式侵入 膜融合 细胞内吞 直接侵入 三、脱壳：毒侵入细胞后，病毒的包膜或壳体去除而病毒核酸释放出来的过程，包括脱囊膜和脱衣壳两个过程。 痘病毒： 双链DNA病毒，但病毒大分子的合成和装配都发生在细胞质内。 痘病毒可以经膜融合或内吞方式进入细胞质内，其脱壳分两步进行： 第一步：外层囊膜在胞膜或吞饮泡膜上被融合,病毒核心释放