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益母草提取工艺条件优化研究 【摘要】益母草为传统妇科良药，现有益母草制剂中多采用水提法进行提取生物碱，但制剂提取工艺条件不统一，本文采用平行实验法对传统的水提法的工艺参数进行考察，确定益母草水提工艺最佳工艺参数为：加水煎煮3次，分别为15倍量2h，12倍量1.5h，10倍量1.0h。本文还对益母草新提取工艺酸醇提取法进行试验和工艺参数进行研究，通过对多种提取方法进行对比试验，并用正交实验法筛选工艺参数，得到优于水提法提取益母草的工艺。 【关键词】益母草 生物碱 提取工艺 水提法 酸醇提取法 益母草为唇形科植物益母草的新鲜或干燥地上部分, 鲜品春季幼苗期至初夏花前期采割, 干品夏季茎叶茂盛、花未开或初开时采割, 切段晒干。益母草为传统妇科良药,其制剂在临床上主治月经不调、妇女产后子宫复原不全和产后子宫出血等症,一直以来被广泛使用。具有调理月经, 收缩子宫之功效，用于治疗月经不调及产后子宫出血, 子宫复原不全。 益母草现有制剂多采用水提醇沉、浓缩干燥为制剂工艺。在对各制剂的具体工艺研究中发现，益母草流浸膏和益母草口服液采用的是同一工艺，与其它工艺相比，该工艺条件较成熟。另外，《中国药典》2005年版一部植物油脂和提取物中收载的益母草流浸膏亦采用该工艺，为确保原料来源，该工艺可作为各种益母草制剂的提取工艺。为保证产品的临床疗效及其稳定性，在原制备工艺的基础上，采用平行实验法对原工艺未有的工艺参数进行考察。 一、水提法工艺优化 1.仪器与试药 1.1仪器：Waters高效液相色谱系统、Aglinet8453-E紫外分光光度计。 1.2试药：盐酸水苏碱对照品(712-200105，中国药品生物制品检定所)。 各种益母草制剂均为市售。 乙睛为色谱纯，其他试剂为分析纯，水为重蒸水。 2.益母草水提工艺溶媒用量筛选 以提取物干膏得率和益母草总生物碱转移率为指标，采用平行实验法对益母草水提工艺的溶媒用量进行筛选。 2.1平行实验表 表1益母草水提工艺平行实验表 因素 实验号 加水量(倍) 提取时间 (h) 1 10，8，6 2.0，1.5，1.0 2 12，10，82 2.0，1.5，1.0 3 15，12，10 2.0，1.5，1.0 4 18，15，12 2.0，1.5，1.0 2.2干膏率测定 称取益母草药材100g，按上述平行实验表进行实验，益母草水提液浓缩至50OmL，量取2m0L置水份测定仪中进行水份测定，根据水份值计算提取物的干膏率。 1.3益母草总生物碱测定 照分光光度法(中国药典2005年版附录VB)测定 对照品溶液制备： 精密称取经105℃干燥至恒重的盐酸水苏碱对照品25mg，置25mL量瓶中，加o.lmol/L盐酸溶液使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得(每lmL中含盐酸水苏碱lmg)。 药材溶液的制备取药材粉末(过3号筛)约3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇50ml，称定重量，超声处理3Omni，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25mL，置蒸发皿中，于水浴上蒸干，精密加入0.lmol几盐酸溶液10mL使溶解，加活性炭.059，置水浴中加热半分钟，搅拌，滤过，滤液置25mL量瓶中，用o.lmolL/盐酸溶液分次洗涤蒸发皿和滤器，洗液并人同一量瓶中，备用。 供试品溶液的制备取益母草水提物干膏适量(约3g药材)，按药材溶液的制备方法制备。 测定法 精密量取对照品溶液10mL，置25mL量瓶中，另取o.lmol/L盐酸溶液20mL，置25mL量瓶中。在对照品溶液、0.1mol比盐酸溶液及上述备用供试品溶液的量瓶中，各精密加入新制的2%硫氰酸铬钱溶液3ml，摇匀，加o.lmol盐酸溶液至刻度，摇匀，置冰浴中放置1小时，用干燥滤纸滤过，取续滤液，以0.lml比盐酸溶液为空白，照分光光度法(附录VB)，在520nm的波长处分别测定吸收度，用空白试剂的吸收度分别减去对照品与供试品的吸收度，计算，即得。 益母草药材中总生物碱含量为：0.69% 1.4益母草水提工艺平行实验结果 表2益母草水提工艺平行实验结果 实验号 因素 结果 加水量(倍) 提取时间 (h) 干膏率（%） 总生物碱转移率（%） 1 10，8，6 2.0，1.5，1.0 28.79 79.10 2 12，10，82 2.0，1.5，1.0 29.35 82.75 3 15，12，10 2.0，1.5，1.0 29.78 89.69 4 18，15，12 2.0，1.5，1.0 30.09 89.19 由上述实验结果可知，益母草水提工艺中溶媒用量对干膏率及总生物碱转移率均有一定影响，但当溶媒用量提高到一定程度之后，再增加溶媒用量对结果无明显影响，尤其是总生物碱的转移率反而有所下降。考虑实际情况，选