病毒重点.docVIP

第七章 病毒 重点、难点剖析 1．病毒以其结构简单,特殊的繁殖方式以及绝对的细胞内寄生显著区别于其他生物,它与单细胞微生物主要性质的比较如表7-1 7-1病毒与单细胞微生物主要性质的比较 主要性质 细菌 立克次氏体 支原体 衣原体 病毒 直径大于300nm + + + － + － － 在无生命培养基生长 + - + - － 双分裂 + + + + － DNA和RNA + + + + － 核酸感染性 － － － － +* 核糖体 + + + + － 代谢 + + + + － 对抗生素的敏感性 + + + + －** *：DNA病毒和RNA病毒中的一部分；**：利福平可抑制痘病毒复制 2．现在的病毒分类系统将已发现的病毒分为dsDNA病毒、ssDNA病毒、DNA和RNA逆转录病毒、dsRNA病毒、负意ssRNA病毒、正意ssRNA病毒和亚病毒因子等7大类，62个病毒科，其中有少数病毒科已分别划归于有尾噬菌体目、单组份负意RNA病毒目和成套病毒目中，并且一些真核生物的逆转录转座子，现在分别归于DNA和RNA逆转录病毒类的假病毒科和转座病毒科。另外将卫星病毒、类病毒和朊病毒归在亚病毒因子类。 3．血细胞凝集试验。一些裸露病毒的壳体蛋白，特别是有包膜病毒的包膜突起，能够引起一定种类脊椎动物的红细胞发生凝集，并且病毒所能凝集红细胞的量与病毒的浓度成正比。血细胞凝集试验即是根据病毒的这一性质设计的病毒定量分析，其方法是将倍比稀释的待测病毒样品液分别与相应种类的动物红细胞一起置于有孔塑料板的小孔中，均匀混合后在适当温度下静置反应，待一定时间后观察结果。由于病毒浓度在各个不同稀释度样品中不同，因而在发生疑集反应的各个稀释度中，血细胞凝集程度有别，故特出现50％凝集(++)的病毒稀释度定为测定终点，称做一个血凝集单位。 4．病毒的终点测定有LD50、ID50、TCID50等之分，但其原理与方法类似，以LD50测定为例：将待测病毒系列稀释后，取等体积的各个稀释度的病毒稀释液接种实验动物，每个稀释度若干只(如6只)，在规定条件下饲养，并间时观察，记录因病毒感染动物致死情况(表7-2)。 表7—2 病毒感染动物致死情况 病毒稀释度 接种动物数 死亡数 存活数 累积值 总死亡数 总存活数 死亡率 比例 % 10-1 6 6 0 17 0 17/17 100 10-2 6 6 0 11 0 11/11 100 10-3 6 4 2 5 2 5/7 71 10-4 6 1 5 1 7 1/8 13 10-5 6 0 6 0 13 0/13 0 根据Read和Muench方法： 半数效应剂量(LD50、ID50、TCID50)：50％感染率(或死亡串)的高临界稀释度倒数的对数+距离比x稀释系数的对数 50％的高临界感染率－50％ 上式中：距离= 50％的高临界感染率－50％的低临界感染率 71%－50% 在上例中：距离= =0.36，稀释系数为10 71%－13% 故LD50＝lg/10-3+0.36×lg10=3.36 即：取一定量的10-3.36病毒样品稀释液接种供试的实验动物群体，可致50%的实验动物死亡。 . 病毒壳体构成原理。任何物质结构取得稳定的必要物理条件是这些结构必须处于自由能最低状态，病毒的壳体结构也不例外。非对称的蛋白质亚基分子彼此结合构成壳体时，要形成最大数目的次级键必须对称排列，形成一高度有序的结构。在这样一高度有序的结构中，亚基之间形成次级键的数目最多，释放的自由能值最大，壳体处于自由能最低状态，结构趋于稳定。根据相对简单的几何原理，病毒壳体可取的结构对称形式只能是圆柱体对称或立体对称。在前一种形式中，由于蛋白质亚基与螺旋盘绕的病毒核酸的结合，故壳体非圆柱对称而是螺旋对称；在后一种形式中，由于在正四面体、正六面体、正八面体、正十二面体和正二十面体这些拓扑等价多面体中，在表面积一定时，以二十面体容积最大，能包含更多的病毒核酸，故病毒壳体取二十面体对称。 6，病毒的复制周期依其所发生的事件顺序分为以下5个阶段：①吸附；②侵入；③脱壳；④病毒大分子的合成，包括病毒基因组的表达与复制；⑤装配与释放。病毒的复制过程概括于图7—1。 7.RNA病毒的基因组RNA种类繁多,其基因表达的方式各有不同,概况如图7-2。 8．以溶源状态存在的噬菌体不能完成复制循环，噬菌体基因组长期存在于宿主细胞内，没有成熟噬菌体产生，这一现象称做溶源性现象，能够导致溶源性发生的噬菌体称做温和噬菌体