低分子量透明质酸片段通过toll样受体4信号途径激活枯否细胞.PDF

中国科学 C 辑 :生命科学 2008 年 第 38 卷 第 11 期 : 1041 ~ 1047 SCIENCE IN CHINA PRESS 低分子量透明质酸片段通过toll 样受体4 信号途径 激活枯否细胞 ①† ②† ③ ④ ④ ① ⑤ ⑤ 张进祥 , 王慧 , 肖青 , 梁慧芳 , 李卓娅 , 蒋春舫 , 吴河水 , 郑启昌 ① 华中科技大学附属协和医院急诊外科, 武汉 430030 ② 华中科技大学同济医学院医学遗传学系, 武汉 430022 ③ 华中科技大学附属协和医院眼科, 武汉 430030 ④ 华中科技大学同济医学院免疫学系, 武汉 430022 ⑤ 华中科技大学附属协和医院普通外科, 武汉 430030 † 同等贡献 E-mail: camelzjx@ 收稿日期: 2007-12-04; 接受日期: 2008-07-25 国家自然科学基金(批准号:和资助项目 摘要 高分子量透明质酸(high-molecular-weight hyaluronic acid, HMW-HA)是重要的肝脏 关键词 6 Da 以上, 可被活性氧分子(reactive oxygen species, ROS)等降解成低 枯否细胞 基质, 分子量高达2 ×10 分子量透明质酸片段(hyaluronic acid fragments, HA fragments), 后者能被toll样受体4 (toll-like 透明质酸片段 receptor 4, TLR4) 识别并激活免疫细胞诱发炎症反应. 基于枯否细胞表达TLR4, 推测HA toll 样受体4 p38MAPK fragments通过激活枯否细胞TLR4 信号系统而启动肝脏缺血再灌注损伤. 从TLR4 基因突变型 脂多糖 (C3H/HeJ, TLR4Mut/Mut)及野生型(C3H/HeN, TLR4+/+)小鼠分离肝脏枯否细胞常规培养, 用酶 缺血再灌注损伤 降解及色谱柱分离方法制备HA fragments, 观察HMW-HA及HA fragments激活枯否细胞的差 肝脏 异, 检测培养上清肿瘤坏死因子-α或白介素-1β水平变化; 枯否细胞p38MAPK信号通路的活 化; 用特异性p38MAPK 阻断剂——SB-203580, 阻断p38MAPK 活化后, 观察培养上清中肿瘤 坏死因子-α或白介素-1β水平变化. 结果显示HA fragments可以促进TLR4+/+枯否细胞分泌促 炎因子, 不能诱导TLR4Mut/Mut 枯否细胞分泌促炎因子. 而HMW-HA 既不能促进TLR4+/+枯否细 胞也不能促进TLR4Mut/Mut 枯否细胞分泌促炎因子. 采用多黏菌素中和脂多糖后, HA fragments 促进TLR4+/+枯否细胞分泌促炎因子的能力不变, 这一过程伴随p38MAPK信号通路的活化. 当运用p38MAPK信号通路的特异性阻断剂SB-203580, 抑制p38MAPK 活性时, HA fragments 促进TLR4+/+枯否细胞分泌促炎因子的能力显著下降. 因此与基质组成成分HMW-HA不同, HA fragments可以通过TLR4 激活枯否细胞, 促进其分泌促炎因子诱发炎症反应, 这一过程依 赖于p38MAPK 的激活. [1] [2] 肝脏缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion in