试验项目i环境中的微生物空气水中细菌总数.pptVIP

实验报告 1、自来水 平板 菌落数 1ml自来水中细菌总数 1 2 2、池水、河水或湖水等 稀释度 10-1 10-2 10-3 平板 1 2 1 2 1 2 菌落数 平均菌落数 计算方法 细菌总数/ml 微生物细胞大小的测定----酵母菌 目镜测微尺 镜台测微尺 已知镜台测微尺每小格为10μm 注明放大倍数！ 本实验报告要求 填相关表格 按实验6、实验7报告要求完成，回答思考题。 无菌操作演示——各组统筹安排 课后： 预习实验2、实验4、实验11及其它相关文献。 每组把实验三、四设计方案发到邮箱wangxinwei76@126.com 具体讨论后实施。 下次上课前一天取污染环境样品 项目II：污染环境优势菌的筛选和形态观察 实验三、四 污染环境优势菌的筛选 实验五、污染环境优势菌的形态观察 实验原理 利用某一种或某一类微生物的特殊营养要求或特殊环境要求，在培养基中加入某些特殊物质配成的培养基，可以抑制非目的微生物的生长，同时促进目的微生物的生长（富集培养基或选择培养基）。 通过菌落特征观察及镜检判断纯培养。 通过测定污染物含量、菌细胞含量或代谢过程的耗氧量等指标来评价微生物的降解能力。 微生物筛选方法 降解菌的富集（驯化）：石油污染土壤样品加入100ml富集用含油液体培养基，连续转接5次。 分离：采用稀释平板法进行分离, 于牛肉膏蛋白胨培养基上,培养单菌落 筛选-纯化：分离后重新转接筛选培养基, 再用牛肉膏蛋白胨培养基分离出单菌落, 纯化，保存。 降解率测定: 菌种鉴定：　 富集培养基（选择培养基）: 牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,石油烃5ml,蒸馏水1000ml。pH7. 0。其中石油烃为原油与柴油按1∶4 (V /V)混合。 分离培养基: 牛肉膏蛋白胨培养基。 筛选培养基: NaNO3 3g, K2HPO4 1g,MgSO4 ·7H2O，0. 5g, KCl 0. 5g, FeSO4 ·7H2O 0. 01g, CaCl2 0. 002g,石油烃(原油∶柴油= 1∶4) 1ml,蒸馏水1000ml, pH7. 0～7. 5。 要求及时间安排 2015.5.13~5.22设计实验方案讨论 （中午12:30~13:30，或其它上班时间，每组讨论一次） 提交内容： 具体实验方案（包括参考文献至少4篇） 所需试剂、设备 * 生长因子是指微生物生长不可缺少的微量有机物，主要包括维生素、氨基酸和碱基等，它们一般是酶、核酸等的组成成分。有些微生物不需要补充生长因子，如大肠杆菌。有些微生物在充足的碳源、氮源，无机盐和水不能生长的原因是必须补充生长因子才能正常生长，如乳酸杆菌就需要补充多种维生素和氨基酸。 * 微生物的碳源谱虽然很广，但对异养微生物来说，其最适碳源是“C·H·O”型。其中，糖类是最广泛利用的碳源，其次是醇类、醛类、有机酸类和脂类等。在糖类中，单糖优于双糖和多糖，己糖优于戊糖，葡萄糖、果糖优于半乳糖、甘露糖。在多糖中，淀粉明显优于纤维素或几丁质等纯多糖；纯多糖优于琼脂等杂多糖和其他大分子多糖如木质素。 * 一般说来，异养微生物对氮源利用的顺序是“N·C·H·O”或“N·C·H·O·X”类优于“N·H”类，更优于“N·O”类，而最不易被利用的则是“N”类。 在微生物发酵工业中，常根据不同微生物的营养需要，利用各种农副产品如玉米粉、米糠、麦麸、马铃薯、甘薯以及各种野生植物的淀粉，作为微生物生产廉价的碳源。这类碳源往往包含了几种营养要素，只是其中各要素的比例不一定适合各种微生物的要求罢了 实验 项目I：环境中的微生物（空气、水中细菌总数）检测 实验一、培养基的配制和灭菌 实验二 环境中的微生物（空气、水中细菌总数）检测 实验一、培养基的配制和灭菌 培养基：人工配制，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。 微生物细胞组成 微生物细胞化学组成 元素 细菌% 酵母% 霉菌% 碳 50-53 45-50 40-63 氢 7 7 —— 氮 12-15 7.5-11 7-10 磷 2.0-3.0 0.8-2.5 0.4-4.5 硫 0.2-1.0 0.01-0.24 0.1-0.5 钾 1.0-4.5 1.0-4.0 0.2-2.3 钠 0.5-1.0 0.01 0.02-0.05 钙 0.01-1.5 0.1-0.3 0.1-1.4 镁 0.1-0.5 0.1-0.5 0.1-0.5 氯化物 0.5 —— —— 铁 0.02-0.2 0.01-0.5 0.1-0.2 微生物营养物质来源 营养物质 来源 有机 无机 碳源 有机糖、醇、有机酸、烃类、蛋白质及其水解产物（能源) CO2、碳酸盐 氮源 蛋白质及其水解产物，胨、肽、氨基酸、嘌呤、嘧啶、脲