Beta-arrestin1和三叶因子3对胃癌细胞BGC-823生物学功能作用的研究.pdfVIP

摘要 摘要 达，可以调节G蛋白耦联受体(G coupledreceptor，GPCR)的脱敏和内吞， protein 是多种信号通路中的多功能调节因子。TFF3是三叶因子家族(Trefoil factors．TFFs)成员之一，TFFs是主要由胃肠道黏液细胞分泌的可溶性小分子多 肽，它们在慢性炎症、黏膜保护修复、细胞凋亡、组织化生及肿瘤的发生发展等 方面具有重要的生物学功能。本实验首次在胃癌细胞BGC．823细胞系中探讨研究 两者对肿瘤细胞的共同影响作用。 我们首先构建Beta．arrestinl及TFF3的重组真核表达载体，利用免疫荧光染色 及共聚焦技术探索并明确两者在HEK-293T细胞胞质中存在共定位，既而研究 GES及其它三种胃癌细胞系中Beta-arrestinl蛋白的表达情况，并选择表达量最高 稳定转染BCJC．823细胞，并应用Westernblot检验干扰Bem-arreaml的蛋白表达情 况；将TFF3全长的重组真核表达载体稳定转染BGC．823细胞，并应用RT-PCR及 水平。并进一步应用CCK．8、划痕实验、Transwelldx室实验及流式技术分析 化，由此考察Beta-arrestinl及TFF3在肿瘤细胞中的生物学作用。 通过上述研究，我们明确了Beta．arrestinl在胃癌中高水平表达且主要定位于 移能力、侵袭能力，并提高凋亡水平。TFF3定位于细胞的胞质中，其过表达水 平能够明显促进BGC．823细胞的增殖、迁移、侵袭能力，并降低肿瘤细胞的凋亡 水平。因此我们推测Be协arreStiIll及TFF3具有促进胃癌细胞活性的生物学功能。 由此，本课题不仅明确Beta．arrestinl及TFF3二者在肿瘤发生发展过程中的共同协 同作用，为肿瘤基因治疗提供初步依据，进一步探讨Beta-arrestinl及TFF3参与调 控肿瘤细胞增殖侵袭的分子机制奠定了基础。 关键词：beta-arrestinl：三叶因子--3；胃癌 Abstract Beta-arrestinlconsistsBeta-arrestinl of and are Beta-arrestin2．They andnot modulatethedesensitizationand ofG ubiquitouslyexpressedonly wdfficking alsoserveasmulti-functionalwhich receptors(GPCRs)but adaptors protein-coupled to isone contributethe of molecules．TFF3oftheThe regulationmultiplesignaling trefoil whichalesecretedfromthe cells factor(TFF)family chiefly mucus-secreting ofthe tract．TFFshavebeen in ofthe gastrointestinal implicatedprotection tract mucosal havean against damage、cellapoptosisetc．They gastrointestinal in