bFGF及肌肽对中期保存兔角膜的保护作用研究.pdfVIP

摘要 fibroblast growth BJ0z_．-*实验旨在比较研究碱性成纤维细胞生长因子(basic (camosine)在中期保存兔角膜过程中，对角膜结构和功能的影响，探讨肌肽应用于角膜中期保存 的可行性和有效性，以期改进中期角膜保存方法。 20 链霉素等配制中期角膜保存液。(2)在中期角膜保存液中加入bFGF和肌肽，分为A(bFGFng／m1)、 20 B(肌肽59／L)、C(bFGF 于4℃下保存新两兰大白兔角膜，于保存第3、7、14天，30—35℃复温后，行角膜大体形态观察、台 盼兰一茜素红联合染色、角膜组织病理切片、扫描电镜及透射电镜观察检测角膜内皮细胞活性，综合 评价保存效果。 (3)保存液存放期间定期行生化及细菌学检测，评价其生物安全性。 结墨1 1、角膜人体形态观察：保存第3天，实验各组及对照组角膜均透明，无水肿、增厚，随着保存时间 的延长，角膜透明度逐渐下降，出现不同程度水肿、增厚，保存第14天，对照组明显水肿增厚，透 明度差；实验各组角膜亦有不同程度水肿增厚，但透明度尚可，其中以A、C组角膜透明度最好。 2、台盼兰一茜素红联合染色：角膜保存第7、14天，实验各组与对照组相比，角膜内皮细胞形态较好， 核监染细胞较少，角膜内皮细胞活性率较高(P0．ooi)，其中以实验A、C组角膜内皮细胞活性率最高， 保存效果最好(P0．001)。 3、角膜组织病理切片：角膜保存第7、14天，实验各组与对照组相比，角膜组织结构较完整，基质 层水肿程度较轻，内皮层与后弹力层贴附较紧密，无明显脱落。 4、超微结构观察：角膜保存第14天，扫描电镜观察显示实验A、C组角膜内皮细胞呈六边形镶嵌结构， 排列规则、Y型连接紧密、表面可见少量微绒毛；实验B组角膜内皮细胞呈较规则的六边形镶嵌结构， 连接较紧密，见少量细胞融合及Y型连接断裂并存：对照组角膜内皮细胞人量坏死，坏死区无明显细 胞结构，存活的内皮细胞明显肿胀，形态不规则，并有细胞融合及Y型连接断裂，胞膜不完整，胞质 裸露。透射电镜观察显示实验组角膜内皮细胞胞体较人，胞质内有少量空泡，线粒体轻度水肿、内 质网轻度扩张；对照组角膜内皮细胞变性坏死现象明显，胞质内有大量空泡形成，线粒体严重肿胀， 内质网明显扩张，细胞核固缩。 5、角膜保存期间，各组保存液均澄清，未见混浊及絮状沉淀。PH值稳定在7．2—7．4，细菌学培养结 果均为阴性。 箜丝L本实验在自制中期角膜保存液中添加bFGF(20n#m1)与肌肽(5∥1)保存兔角膜，可明显提高保 存角膜的质量，延长保存时间，证实bFGF和肌肽均具有保护角膜细胞结构和功能的作用，二者均 可以应用于角膜中期保存；但与bFGF相比，肌肽的保护作刚相对较弱。 羞键逦：内皮细胞，角膜；中期保存；成纤维细胞生长冈子；肌肽；抗氧化 Abstract theroleofbasicfibroblast carnosineoncome垃s —Obie—ctive：Toinvestigate growthfactor(bFGF)and inmid-term the ofcarnosinein medium，meanwhile，to preserved preserving exploreavailability applied mid—tom orderto themediumofcornealmid-term medium，in preserving improve preservation． makecornea basalmediumofMEMasitsmainconstituentand —Meth—od