Bigelovin对人上皮性卵巢癌细胞和外周血单个核细胞的体外影响.pdfVIP

中文摘要 Bi I OVi ge n对人上皮性卵巢癌细胞及外周血 单个核细胞的体外影响 摘 要 Ovarian 目的：上皮性卵巢癌(Epithelial ’‘系统常见的三大恶性肿瘤之一【1]，因缺乏早期诊断方法，五年生存率在 30％左右C2-53。肿瘤细胞减灭术联合以铂类和紫杉醇类为基础的化疗是EOC 的标准治疗方法，可大大改善卵巢癌患者的预后[e-lO]。但所有铂类药物均 能引起严重的不良反应，骨髓抑制是最常见的化疗副反应之一。骨髓抑制 严重时可出现继发感染、出血、甚至药物性再生障碍性贫血，是不良预后 的危险因素之一。另外，卵巢癌术后化疗耐药和肿瘤复发是卵巢癌治疗中 又一棘手问题…’1纠。一半以上患者死于化疗的毒副作用和肿瘤的耐药复发 哺’1朝，因此寻找低毒高效的化疗药物可能成为解决卵巢癌复发和耐药的有 效手段，对改善患者预后和提高生活质量有重要的临床意义。 倍半萜烯内酯类化合物是从植物中提取的一类天然倍半萜类化合物， 广泛存在于菊科、伞形科、大戟科、卫茅科、豆科、葫芦科和毛莨科中， 大多具有一定的生物活性，如抗肿瘤、强心、抗疟、抗菌、抗急慢性炎症 等¨“。目前对此类物质的研究转向了抗肿瘤和逆转肿瘤耐药方面。 种肿瘤细胞的生长，且对耐长春碱的上皮性癌细胞系具有很强的细胞毒作 倍体细胞的作用尚未见报道。 周血单个核细胞(PBMC)增殖及细胞周期的影响，旨在寻找低毒高效的卵 巢癌化疗药物，为克服卵巢癌化疗的毒副反应和耐药提供实验依据，为抗 卵巢癌药物的体外筛选提供科学的实验设计思路和实验方法。 方法： 1 中文摘要 进入对数生长期时用于实验。 2 密度梯度离心法分离并培养PBMC细胞：无菌采集正常肘静脉肝素抗凝 血，D-PBS溶液等比稀释后，加入淋巴细胞分离液面离心，取中间白膜层洗 盼蓝排斥试验观察细胞活力。培养24h后，用不含PHA的新鲜培养液接种细 ‘ 胞于96—7L板中，静置2h后加药观察。 和PBMC细胞，在倒置相差显微镜下定时观察细胞的生长情况。 4 MTT比色试验法 4．1 选择不同观察时间细胞的最佳接种密度：观察在含10％FBS的 II RPMI-1640培养液200 3X x104／mL密 制接种密度一吸光度(OD值)曲线，选择各观察时间细胞的最佳接种密度。 4．2选择细胞的最佳接种方式：以8 检测吸光度，比较相同作用时间下，细胞接种密度对DDP抑制率的影响， 选择细胞的最佳接种方式。 细胞体外增殖的影响，计算药物的半数抑制浓度(IC50)、耐药指数和效能 比，评价bigelovin对上皮性卵巢癌细胞的药效。 (0uM、2pM、4uM、8u uM、4uM、8 M)作用于SK—OV一3细胞24h，(0 pM、16uM)作用于SK-OV-3／DDP细胞72h。 6应用SPSSl3．0软件进行统计学分析。 结果： 中文摘要 呈扁平的多角形，“铺路石”状，边界模糊，折光性差。PBMC呈圆形，大 轻微贴壁，但不变形。Bi gelov 对照组减少，胞膜皱缩明显。上述细胞凋亡变化随药物浓度和作用时间的 增加而逐渐明显。 2 MTT法检测结果 u 2．1最佳接种密度：在200 X 72h的最佳接种密度分别选择6×104／ⅡlL、3104／mL、1．5×104／IIlL； X104／mL、3×104／IIlL；PBMC72h接种密度选择50×104／IIlL。 2．2最佳接种方式：同一观察时间