CD1基因多态性及格林-巴利综合征易患性的相关研究.pdfVIP

CDl基因多态性与格林一巴利综合征易患性的相关研究 中文摘要 CDl基因多态性与格林．巴利综合征易患性的相关研究 研究生刘洪波 导师滕军放杨波 郑州大学一附院 中国郑州450052 中文摘要 研究背景及目的 格林一巴利综合征(Guillain-Barre 素相关的神经系统自身免疫性疾病，虽发病机制尚不清楚，但目前认为前 驱感染的病原微生物表达的糖脂抗原所诱导的分子模拟机制为其可能的 发病机制。CDl抗原呈递分子(Cluster 糖脂、脂类抗原并将其呈递给抗原特异性T淋巴细胞的MCH(主要组织 相容性复合体)样糖蛋白，在格林．巴利综合征炎症反应的启动过程中发 挥着决定性的作用。研究发现在人类第l号染色体上共存在有5种位置上 2区存在基因变异，具有多态性，然而仅引起CDlA与CDlE分子的氨基 酸置换。研究表明，这种多态性在欧洲人、美洲人以及中国人及其少数民 族等正常人群中均有表现。CDl分子与神经免疫性疾病(如：多发性肌炎、 重症肌无力、多发性硬化等)的关系也有报道，目前国外对GBS与CDl 者，认为CDl基因多态性在GBS患者和正常人群间有明显差异，而荷兰 CDl基因多态性与格林一巴利综合征易患性的相关研究 中文摘要 学者Kuijf等研究了北欧GBS患者与正常人之间CDl基因多态性的关系， 得出了两组间无显著性差异的结论。中国人中GBS患者与CDl基因多态 性的关系如何尚无报道。因此有必要研究CDl基因多态性尤其是CDlA 与CDlE基因多态性与GBS遗传易患性之间的关系，以便从分子水平来 探讨GBS的免疫遗传发病机制。 资料与方法 其中男性35例，女性21例，年龄11～55岁，平均(31．2±5．3)岁。GBS 与患者无血缘关系的成员，共67名，均为近期无感染临床相关症状，并 排除患有自身免疫性疾病病史者，男性40例，女性27例，年龄10--一57 岁，平均(32．3±6．7岁)。 及健康对照组患者静脉血3ml于无抗凝剂的真空采血管中。吸取上层血清 ELISA试剂盒操作步骤来测 准备进行同批测定。按照人空肠弯曲菌IgM 定血清标本中IgM抗体水平。 脉血2ml于EDTA抗凝管中，所有静脉血标本均保存于．40。C低温冰箱中。 应用全血基因组DNA提取试剂盒，自抗凝血中提取DNA，随后PCR扩 增全血基因组CDlA与CDlE外显子2区基因片段，琼脂糖凝胶电泳确定 CDI基因多态性与格林一巴利综合征易患性的相关研究 中文摘要 PCR产物。最后，应用限制性内切酶酶切PCR产物，再进行2％琼脂糖凝 胶电泳产生3种不同的电泳条带，即不同的基因型。 结果 一．GBS患者血清空肠弯曲菌(CJ)感染率的比较 与GBS组比较差异有统计学意义(PO．01)。 型相比无显著性差异(PO．05)。 3．36例GBS CJ-IglVf抗体含量与在轻度患者组与重度患者组中不同，轻 有显著性差异(PO．05)，重度组患者IgM含量高于轻度组患者。 二．CDlA、CDlE基因多态性检测 琼脂糖凝胶水平电泳后，均产生3条不同的电泳条带(即不同的基因型)。 446bp，287bp，159bp CDl基因多态性与格林一巴利综合征易患性的相关研究 中文摘要 生酶切，只出现434bp一条带。 对照组(27．61％)明显降低(PO．01)。GBS 等位基因频率与GBS组类似，与健康对照组对比差异显著(PO．05)。 (Po．05)。GBS 与健康对照组对比无显著性差异(PO．05)。 结 论 1．空肠弯曲菌(CJ)感染与GBS发病密切相关，进一步证实空肠弯曲菌可 索型之间的分型。 2．GBS重症患者空肠弯曲菌IgM抗体含量显著高于轻症患者。 4 CDl基因多态性与格林一巴利综合征易患性的相关研究