CD39在普萘洛尔治疗血管瘤裸鼠模型中的影响机制探讨.pdfVIP

目 录 1 CD39 在普萘洛尔治疗血管瘤裸鼠模型中的作用机制探 讨 ……………………………………………………………1 1.1 中 文 摘 要…………………………………………………1 1.2 英 文 摘 要…………………………………………………3 1.3 前 言………………………………………………………5 1.4 材料与方法…………………………………………………6 1.5 结 果………………………………………………………17 1.6 讨 论………………………………………………………26 1.7 结 论………………………………………………………29 1.8 参考文献……………………………………………………30 1.9 英汉缩略词对照表…………………………………………33 2 致 谢………………………………………………………34 3 CD39 在肿瘤发生发展中的作用研究进展 （综述）……35 CD39 在普萘洛尔治疗血管瘤裸鼠模型中的作用机制探讨 摘 要 目的：建立婴幼儿增殖期血管瘤的裸鼠模型，探讨CD 39 在普萘洛 尔治疗增殖期血管瘤中的作用机制。方法：将在手术室无菌条件下手术 切除的婴幼儿增生期毛细血管瘤新鲜标本，均匀切成小块 （约 3.0mm×3.0mm×3.0mm ）移植入实验裸鼠臀背部皮下，每只皮下移植两 个瘤体组织，建立婴幼儿血管瘤的裸鼠异种移植的动物实验模型。在移 植45 天后，将移植组织均成活的60 只的实验荷瘤裸鼠进行随机对照分 组实验，随机分为两个实验小组：组 A （普萘洛尔治疗组），组B （生 理盐水对照组），每组30 只。无菌条件下，分别给予普萘洛尔溶液和生 理盐水灌胃进行干预，隔日一次。在首次给予药物治疗前、治疗后7 天、 14 天、21 天、28 天，使用颈椎脱臼法，分批将实验裸鼠处死，每次每 组随机处死6 只，切取瘤体组织。用游标卡尺分别测量两组实验裸鼠移 2 植瘤横径b 的和最大直径a,并根据公式 V=π／6×a×b 估算肿瘤体积变化 情况 ；将切取的瘤体组织石蜡包埋，制成切片，进行HE 染色，分析瘤 体组织特点，同时进行免疫组织化学染色，检测组织的CD39、Caspase-3 和 Ki-67 的表达；TUNEL 法检测移植瘤组织中的细胞凋亡情况；采用 Pearson 相关分析法进行CD39 表达光密度值与细胞凋亡的相关性分析； 酶联免疫吸附法 （ELISA ）检测移植瘤组织的ATP 浓度；所有的实验数 据统计学分析使用SPSS 19.0 统计软件进行。结果：治疗前，各组的实 验裸鼠的血管瘤组织都生长良好，组间瘤体的体积无显著差异（P ＞ 1 0.05 ）。治疗后 7 天、14 天，生理盐水对照组的血管瘤瘤体体积继续生 长、增大，而普萘洛尔治疗组血管瘤瘤体体积明显小于生理盐水对照组 （P0.01 ）。干预后21 天、28 天，普萘洛尔治疗组瘤体进一步缩小，较 前更加明显，而生理盐水组裸鼠瘤体也开始不同程度的缩小，但是幅度 较小。在镜下观测瘤体标本HE 染色切片，普萘洛尔治疗组瘤体组织血 管减少、破坏，管间纤维脂肪组织浸润，血管内皮细胞分散、稀疏、萎 缩，血管壁塌陷、变形，管腔有闭塞、破坏征象；而生理盐水对照组血 管瘤瘤体组织毛细血管丰富，密集，未见管腔和血管壁有萎缩、破坏征 象。普萘洛尔治疗组的CD39 光密度 （MD ）和Ki-67 的阳性指数与生理 盐水对照组相比均有减少，两组间有显著差异性 （P0.05 ）。普萘洛尔 治疗组的Caspase 3 和细胞凋亡指数明显高于生理盐水组，两组间有显 著差异性 （P0.01 ）；ELISA 法检测ATP 浓度，显示普萘洛尔治疗组高 于生理盐水对照组，两组之间有显著差异性 （P0.05 ）。 CD39 表达与 瘤体细胞凋亡呈负相关（r=-0.649,P0.01 ）。结论：1.普萘洛尔可促进 婴幼儿增生期血管瘤裸鼠模型中的瘤体消退。2.普萘洛尔对增生期血管 瘤的治疗机制与血管瘤内皮细胞上C