HLA-DQA1基因多态性及儿童支气管哮喘的相关性及血清IL-4、IFN-γ水平关系的研究.pdf

目 录 1 HLA-DQA1 基因多态性与儿童支气管哮喘的相关性及血清 I L - 4 、I F N - γ 水平关系的研究 1.1 中文摘要………………………………………………………1 1.2 英文摘要………………………………………………………2 1.3 前言……………………………………………………………6 1.4 材料与方法……………………………………………………8 1.5 结果……………………………………………………………20 1.6 讨论……………………………………………………………25 1.7 结论……………………………………………………………33 1.8 参考文献………………………………………………………34 1.9 英汉缩略词对照表……………………………………………39 2 致谢……………………………………………………………40 3 H L A 基因多态性与支气管哮喘的关系研究进展（综 述）……………………………………………………………41 2 2 HLA-DQA1 基因多态性与儿童支气管哮喘的相关性及血清IL-4 、 IFN-γ 水平关系的研究 摘 要 目的：探讨人类白细胞抗原HLA-DQA1 基因多态性与儿童支气管哮喘的关 联性，寻找与哮喘发作有关的易感基因和（或）抑制基因；观察哮喘组的血 清 IL-4 、IFN-γ 水平；比较含有及不含有哮喘相关基因的哮喘患者血清中 IL-4 、IFN-γ 的浓度，分析是否有差异，为进一步研究哮喘发病机制、预防 哮喘发作及寻找基因水平上治疗哮喘的方法提供相应的理论依据。方法：1. 标本采集：哮喘组：选取急性发作期哮喘患儿共45 例为哮喘组。对照组： 收集与哮喘组年龄相仿的正常健康儿童60 例为对照组。2.检测方法及指标： 采用聚合酶链反应—序列特异性引物(PCR-SSP)方法测定哮喘组、对照组的 HLA-DQAl 等位基因，并计算两组中各等位基因的基因频率（直接计算法： 基因频率= 阳性基因数/样本数×2），两组间进行比较；采用双抗体夹心酶联 免疫吸附法（ELISA ）测定哮喘组、对照组中血清IL-4 、IFN-γ 水平浓度， 并对结果进行统计学处理。3.统计学处理：运用SPPS-17.0 软件系统分析， 哮喘组与对照组各等位基因的基因频率比较采用 χ2 检验，P0.05 认为有统 计学意义，并计算优势比（OR ）及95 ％置信区间。测定的血清IL-4 、IFN-γ 水平浓度，经SPPS-17.0 软件系统分析后结果用均数±标准差（ ±s ）表示， 两两比较采用LSD-t 检验，相关分析采用Pearson 相关性分析，P0.05 认为 有统计学意义。结果：（1）哮喘组与对照组之间HLA-DQA1 等位基因频率 比较：HLA-DQA1*0301 在哮喘组的基因频率（20.00% ）明显高于对照组 2 （8.33%），χ =7.159，P=0.007 ，有统计学意义，OR 为3.333 （95%置信区间 1 1 为1.35-8.229 ）。HLA-DQA1*0 104 在哮喘组的基因频率（27.77% ）明显低于 对照组（38.33% ），χ2 值为5.234，P=0.022 ，差异有统计学意义，OR 为0.380， 95%置信区间为（0.164-0.880 ）。（2 ）哮喘组和对照组外周血IL-4 、INF-γ 水 平比较：哮喘组中血清 IL-4 水平(116.45 ±20.45) 明显高于对照组(90.34 ±13.43),差异有统计学意义（P0.05 ）；哮喘组血清IFN-γ 水平(65.34± 12.34) 明显低于对照组(84.23 ±13.42)，差异有统计学意义（P0.05 ）；（3 ）哮喘组 IFN-γ 与IL-4 的相关性分析：哮喘急性发作期血清IFN