光激化学发光免疫分析技术在乙肝两对半检测中的应用与性能评价.pdfVIP

光激化学发光免疫分析技术在乙肝两对半检测中的应用与性能评价 张阳根 胡桂华 黄林江 【摘要】 目的 对Lica光激化学发光免疫分析系统主要性能进行初步评价。方法 以 美国临床实验室标准化协会CLSI ）制定的评价标准，通过一系列实验设计，对Lica光激化学 发光免疫分析系统进行乙肝“两对半”检测的精密度、准确度、线性、分析灵敏度等进行评价。 结果 Lica光激化学发光免疫分析系统进行乙肝“两对半”检测，批内不精密度变异系数在 1.49%～4.40%，总不精密度在2.15%～6.22%，回收试验的回收率为96.32%～106.54%， HBsAg 、Anti-HBs 、HBeAg 、Anti-HBe 、Anti-HBc 的分析灵敏度分别为0.04 ng/mL、1.72 mIU/mL、 0.09 PEIU/mL、0.31PEIU/mL、0.02 PEIU/mL。结论 Lica光激化学发光免疫分析系统各方 面性能良好，测定样本快速、准确、精密可靠，能适应医院日常样本的检测需要。 【关键词】肝炎，乙型，慢性；光激化学发光免疫分析系统；性能评价；精密度；线性 中国是乙型肝炎（简称乙肝）病毒感染的高发区，所有乙肝患者中15%～25%将死于慢 性肝病（肝癌、肝硬化），因此，及时、有效的检测方法对乙肝的诊治显得尤为重要。随着 对乙肝研究的深入和新的抗病毒药物的问世，仅仅定性检测已经满足不了临床需求。近年来， 随着定量免疫检测技术平台的完善和新的检测技术化学发光技术的发展和成熟，乙肝定量检 测已经成为不少实验室的选择。笔者对本科室目前使用的博阳生物科技（上海）有限公司生 产的光激化学发光分析（Lica ）光化学发光免疫分析系统（包括Lica SP全自动加样器及Lica HT高通量分析仪）及配套乙肝 “两对半”检测试剂盒进行了初步性能评价，现报道如下。 材料与方法 一、材料 1.样本资料：收集本院门诊及住院患者血清以及各项目临床异常高值标本。 2.仪器与试剂：采用Lica光激化学发光免疫分析系统，乙肝“两对半”检测试剂盒及配套 校准品（批号：H 1012），高值（H ）及低值质控物（批号：C 1012）。 二、方法 1.实验准备：对仪器进行维护保养及校准，连续观察仪器运行状态1周，运行稳定且状 作者单位：363000 福建漳州，中国人民解放军第一七五医院（张阳根）；厦门大学医学院 附属东南医院检验科(胡桂华，黄林江) 态良好，熟悉仪器操作及实验步骤后进行各项性能评价。所有实验运行均在仪器状态良好， 质控在控前提下进行。 2.实验设计 （1）精密度评价：采用上海博阳同一批号2个浓度质控品H 、L，根据CLSI EP5－A2 文件要求开展重复性试验，并计算批内不精密度及总不精密度。 （2 ）准确度评价：鉴于目前尚无相关质量评价以及比对依据，采取回收试验的方法， 将临床常规样本与各浓度校准品等量1 ∶1混合，通过检测前后浓度值及校准品给定值计算回 收率。 （3 ）线性评价：根据CLSI EP6 －A文件要求进行线性试验。高值标本（H ）：分别收 集各项目超过试剂说明书线性范围上限标本。低值标本（L ）：分别收集各项目低于试剂说 明书线性范围下限的标本，难以收集时用新生牛血清代替。 测定样本11个水平浓度，将H 和L按0 ∶10、1 ∶9、2 ∶8„„9 ∶1、10 ∶0 的比例各自配 置混合，形成系列测试标本。每个浓度样本测试4次，所有样本应尽量在1次实验中测试完成。 记录测定结果，计算测定结果的均值。以测得的均值为实测值，与计算预期值进行比较。用 直线回归统计对数据做处理，计算回归方程Y ＝bX ＋a 。 （4 ）分析灵敏度：取上海博阳校准品1 （浓度为0 ）各2支。要求在1次运行中将校准品1 重复测定20次。计算该校准品1光信号的均值（MEAN ）和标准差（SD ），然后将MEAN ＋ 2SD （夹心法），或MEAN －2SD （竞争法）所对应的光信号带入校准曲线，计算得到的浓 度为该项目的分析灵敏度。 3.统计学处理：所有数据均使用Excel 2003软件处理。 结 果