S100A蛋白在角膜新生血管中的实验探究.pdfVIP

摘要 目的SIOOA蛋白家族主要参与多种炎症的病理过程，其中的部分成 员还可能参与肿瘤、新生血管等病理过程的发生、发展。本课题旨在研 程，并进一步通过诱导形成新生血管的体外及体内模型，探讨S100A8／9 蛋白在其中的变化规律及作用机制。 小鼠角膜诱导两种CorNV模型，进行基因表达谱的芯片分析。在缝线术 后不同的时间点，取材做病理切片来检测角膜基质部炎性细胞的浸润情 SIOOAl3)，促炎症细胞因子(IL—lB、IL-6、转化生长因子B1和MIP-2)， 以及促血管生成因子(成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子)。用 免疫荧光的方法检测长有新生血管的角膜中中性粒细胞或巨噬细胞浸 缝线诱导角膜新生血管模型(S-CorNV)中发挥的作用。体外观察 力的作用。体内采用Matrigel皮下注射的方法，通过对血红蛋白定量 和HE组织切片的比较，从而验证S100A8／9蛋白对新生血管的促生长变 化。 结果基因芯片分析显示，与正常小鼠相比，两种CorNV模型中的 模型角膜中SIOOA和细胞因子表达的变化具有时间依赖性，在术后第5 天达到顶点。免疫荧光显示角膜中的中性粒细胞和巨噬细胞能够分泌 除可以减轻发病的严重程度，并且减少了角膜新生血管中S100A8／9蛋 白的产生，同时SIOOA基因和促炎症或促血管生成的基因上调的程度也 用Matrigel对照组比较，皮下注射含有S 的新生血管生长明显，其中的血红蛋白含量高，局部浸润的炎性细胞较 多，从而证明S100A8／9蛋白在体内能够促进新生血管的形成。 结论SIOOA蛋白参与了炎症性角膜新生血管的发病过程，尤其是 同时，体内体外的实验也证明S100A8／9蛋白参与新生血管的形成过程， 可能是通过直接作用于血管内皮细胞而实现的。 博士研究生 李长优(眼科学) 指导教师 王宜强研究员 关键词：新生血管；角膜；S100蛋白；免疫治疗；基因芯片 Abstract S100A iSinvolvedinvarious Purpose：Theproteinfamily inflammatoryprocesses． SeveralmemberslikeS1 1 00A4，S00A6andA13are tobe in proved pro—angiogenic tumor examineswhetherSl00A areinvolvedinthe development．Currentstudy proteins ofinflammation—associatedcorneal pathogenesis researchevaluatestheeffectsand mechanismofS100A8／9 in proteins invitroandinvivo． byexperiments Methods：Weused chemical CorNV suture．(S)orbum(CB)．induced 1咖nylon modelsinBal or b／c C57BI／6micefora ofthe microarrayanalysis genome．wide differenttime after