TNFAIP8在胃癌中表达的研究和临床意义.pdfVIP

摘要 摘要 胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一，是最常见的消化道恶性肿瘤。早期胃癌多 无症状或仅有轻微症状。当有明显不适就医时，往往病变已属中晚期。虽然胃癌 发病的确切机制尚不完全清楚，但是环境因素、遗传因素等调节机制在胃癌的癌 前病变及肿瘤发生发展过程中均处于重要的地位，免疫调节在胃癌的发病过程中 也起着重要的作用。 necmsisfIacto卜ainduced 肿瘤坏死因子a诱导蛋白8(Tlmor proten8， n婚AIP8，TIPE)是调控凋亡过程的重要分子之一。随着研究的不断深入， TNFAIP8蛋白在细胞凋亡、信号传导、肿瘤细胞增生、侵袭及转移等生命过程 中具有重要的调节作用。TNFAIP8蛋白的多效应性及T伊E2在维持机体免疫动 态平衡中的调控作用预示着TNFAIP8家族在免疫学及医学研究中可能极具应用 价值。 按照起始caspase的不同，可将哺乳细胞的凋亡分为三种基本的途径。一种称 为外在途径，由细胞表面的死亡受体如Faus和肿瘤坏死因子受体家族引发：另一 种称为内在途径或线粒体途径，由许多应激条件、化学治疗试剂和药物所起始， 第三种途径是内质网应激所导致的caspase．12的活化，从而导致凋亡。为了研 究TNFAIP8在胃癌发生发展中的作用及其免疫机制，本实验首先构建了 blot)技术和逆转录聚合 INFAIP8过表达质粒，并用蛋白免疫印迹方法(weStem 酶链反应(ImPCR)方法对构建的耵姬AIP8过表达质粒进行了鉴定，。然后从临 床获取的胃癌病人手术切除的组织进行了检测：利用免疫组织化学方法检测胃癌 组织中耵姬AIP8的表达；采用蛋白免疫印迹方法分析肿瘤组织中TNFAIP8蛋白 水平的表达情况；并进一步利用逆转录聚合酶链反应方法了解肿瘤组织和肿瘤细 胞中TN刚P8基因水平的表达情况。在获得了TNFAIP8在肿瘤细胞和肿瘤组织 中的表达基本情况后，通过培养人胃癌细胞系BGC823，将TNFAIp8过表达质 抗体刺激后，采用蛋白免疫印迹方法检测天冬氨酸特异性的半光氨酸蛋白水解酶 m 摘要 (caSpase)的表达；并采用流式细胞仪技术分析转染后的过表达耵脚8对胃 癌细胞的凋亡和其周期的影响，进而探讨耵脚8在胃癌形成中的作用。 实验通过发现胃癌患者肿瘤组织中n晒甜P8的删险IA水平和蛋白水平的表 达量都与胃癌的分化和分期密切相关，n晒AIP8在低分化和进展期胃癌中的表 达明显高于中分化和早期胃癌；为进一步研究耵旺Am8和胃癌之间的关系，在 此研究基础上，本实验构建了n厄触P8过表达质粒，并送公司测序鉴定。然后 胃癌细胞转染前后的凋亡和周期的变化，发现过表达的n汀FAJP8减少了胃癌细 胞的凋亡，延长了胃癌细胞周期的S期，促进胃癌细胞的有丝分裂，进而促进了 胃癌细胞的增殖。为进一步探讨过表达的耵旺AIP8在胃癌形成中的作用，同样 后较转染前明显减少，从而可以解释过表达的1NFAIP8通过线粒体细胞凋亡通 路负性调控胃癌细胞的凋亡。据以上的研究结果，我们得出以下结论：在胃癌的 发生发展过程中，耵姬AIP8的表达可能发挥一定的作用，TN蹦P8可能参与了 胃癌的发生、发展。为进一步研究胃癌的发病机制提出一种新的思路。 关键词： 胃癌；TNFAIP8；caSpase Ⅳ Abstract Abstract oneofcommon tllemostc0IImlon G锄iccanceris malignanttuInors证Chjn码is canCer mildevenno gaSt