AMPK通过抑制炎性反应减轻小鼠肾脏缺血再灌注后-中华肾脏病杂志.PDFVIP

·450· 中华肾脏病杂志2016年6月第32卷第6期 ChinJNephrol,June2016,Vol.32,No.6 ·基础研究 · AMPK通过抑制炎性反应减轻小鼠肾脏 缺血再灌注后纤维化 周俊 林文静 林森 黄振兴 黄腾 仲吉英 杨承祥 【摘要】 目的 探讨腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）抑制炎性反应在小鼠肾脏缺血再灌注 损伤（IRI）后期纤维化中的作用。 方法 48只雄性C57BL/6小鼠，随机分为假手术组（Sham 组）、IRI组、AMPK抑制剂+IRI组（AMPK/IRI组）和生理盐水+IRI组（NS/IRI组），每组各12只。 肾脏缺血再灌注行双侧夹闭肾蒂30 min后开放肾灌注，Sham组分离双侧肾蒂但不夹闭。 AMPK/IRI组和NS/IRI组小鼠IRI术前分别腹腔注射20mg/kgAMPK特异抑制剂CompoundC和 等量生理盐水。术后2d每组随机各取6只小鼠，留取血液及肾组织标本，苏木精⁃伊红（HE） 染色观察肾组织病理变化，全自动生化分析仪检测血尿素氮（BUN）及血肌酐（Scr）含量， Western印迹检测AMPK磷酸化水平，实时定量PCR 法检测IL⁃1β、IL⁃6和TNF⁃α的mRNA表 达。术后14d取每组剩余6只小鼠的肾组织标本，天狼星红苦味酸（Sirusred）染色观察肾组 织病理变化，免疫荧光、Western 印迹检测肾组织胶原蛋白1（COL1）、α平滑肌肌动蛋白 （α⁃SMA）和纤连蛋白（FN）的表达。 结果 与Sham组比较，IRI组、NS/IRI组小鼠术后2 d的 肾组织小管间质损害加重（P ＜0.05），血BUN、Scr均升高（均P ＜0.05），IL⁃1β、IL⁃6和TNF⁃α的 mRNA表达均明显增多（均P ＜0.05），肾组织AMPK磷酸化水平均增加（均P ＜0.05）；术后14d 的肾组织纤维化程度明显，COL1、α⁃SMA、FN表达均增加（均P ＜0.05）。与IRI组比较，AMPK/ IRI组术后2d肾小管损害明显加重（P ＜0.05），血BUN、Scr均明显升高（均P ＜0.05），IL⁃1β、IL⁃6和 TNF⁃α的mRNA表达明显增多（均P ＜0.05），AMPK磷酸化水平明显降低（P ＜0.05）；术后14d 的肾组织纤维化程度更明显，COL1、α⁃SMA、FN表达量增多（均P ＜0.05）。结论 在小鼠IRI 引起的肾脏纤维化进程中AMPK可减轻纤维化，可能与减轻炎性反应有关。 【关键词】 纤维化； 肾疾病； 再灌注损伤； 细胞内信号肽和蛋白质类； 炎症 基金项目：广东省科技计划项目（2014A020212612） AMPK attenuates inflammation to reduce fibrosis induced by acute ischemia reperfusion injury in mice Zhou Jun, Lin Wenjing, Lin Sen, Huang Zhenxing, Huang Teng, Zhong Jiying, Yang Chengxiang. Department of Anesthesiology, the First Peoples Hospital of Foshan, Foshan 528000, China Corresponding author: Yang Chengxiang, Email: ycxiang@ 【Abstract 】 Objective Toobservetheeffectofadenosinemonophosphateactivatedprotein kinase(AMPK)onattenuatinginflammationinfibrosisinducedbyacuteischemiareperfusioninjury (IRI)inmice. Methods FortyeightmaleC57BL/6 micewererandomlydividedintofourgroups: sham operation group (sham group), IRI group, AMPK inhibitor+IRI group (AMPK/IRI group) and normalsaline+IRIgroup(NS/IRIgroup), 12miceeachgroup.T