土壤实验方案.docVIP

不同氮素形态配比对不同小麦品种土壤学效应的影响 一、目的意义 通过研究铵态氮、硝态氮不同配比条件下，不同小麦品种土壤物理特性、化学特性、酶活性及土壤微生物量的动态变化，了解不同小麦品种土壤学特性的变化规律和不同氮素形态配比调控的机理，为生产上合理使用氮肥，提高小麦产量和品质提供技术保障。 二、供试材料和试验处理 试验在河南科技大学教学农场进行。选用优质冬小麦品种（强筋小麦郑麦9023、中筋小麦郑麦004、弱筋小麦周麦22）为供试材料，设置不同氮素形态配比即铵态氮/硝态氮25:75、50:50、75:25种处理每公顷施240kg，P205 75 kg，K20 120 kg，分两次施，底、追肥各一半作为底肥一次性施入。所用硝态氮为硝酸钠，铵态氮为碳酸氢铵。裂区设置，三个重复，出苗后三叶期定苗，田间管理措施同丰产大田。5 点混合取样法，分别用土铲取冬小麦根际土（附着在作物根系上的土，它是土壤酶的聚集区），土钻取非根际土（两行之间靠近冬小麦根部0～40cm）土样，分别混合均匀后装入无菌纸袋, 立即带回实验室。将新鲜土样经自然风干，然后将样品中非土壤物质（包括石块、杂草、小根系等物）全部去掉，研磨过1mm 筛，保存待测。 3.2 测验指标及方法 3.2.1不同氮素形态配比对土壤水分的影响 分0-20cm、20-40cm、40-60cm、60-100cm，在拔节期、开花期、灌浆初期（花后10天）、灌浆中期（花后20天）和成熟期用烘干法测定。 3.2.2不同氮素形态配比对土壤化学特性的影响 有机质的测定采用重铬酸钾容量法—外加热法或稀释热法。 全氮的测定采用半微量开氏法；碱解氮的测定采用碱解扩散法。 全磷的测定采用HClO4—H2SO4（高氯酸—浓硫酸）法；速效磷的测定采用碳酸氢钠提取法。 全钾的测定采用NaOH熔融，火焰光度法；速效钾的测定采用NH4OAc浸提，火焰光度法。 3.2.3不同氮素形态配比对土壤酶活性的影响 过氧化氢酶活性（单位为0.1M KmnO4 ml/g干土，20min）是用高锰酸钾滴定的方法测定，其活性以单位土重的0.1mol/LKMnO4毫升数（对照与试验测定的差）表示。（1）方法原理：本方法是基于高锰酸钾滴定酶促反应前后，过氧化氢的量。由二者之间的差求出分解H2O2的量，以此来表示酶的活性。(2)方法步骤：称取5g过1毫米筛的风干土样，置于150ml三角瓶中，注入40ml蒸馏水和5ml0.3%过氧化氢；同时设置很对照，即三角瓶中注入40ml蒸馏水和5ml0.3％过氧化氢，而不加土样；塞紧瓶塞，置于120r/s往返式摇床上，振荡30分钟；随机注入5ml 3mol/LH2SO4以终止反应用致密滤纸过滤；取滤液25ml ,用0.1mol/LKMnO4溶液滴定至微红色。 转化酶即蔗糖酶，是用Na2S2O3溶液滴定的方法进行测定。转化酶活性（单位为NH2-N mg/100g干土，37℃，24h）用对照与试验的滴定毫升数之差表示。（1）方法原理：5KI+KIO3+3H2SO4→3K2SO4+3I2+3H2O；Cu2++e-→Cu+；I2+2S2O3→2I-+S4O62-。 (2)试验步骤：取10g土壤置于100ml三角瓶中，用1.5ml甲苯处理15min，加10ml 20%蔗糖和10ml PH5.5醋酸盐—磷酸盐缓冲液，摇匀后放在370C恒温箱中培养24小时，培养结束后，加50ml蒸馏水，摇匀后过滤。取20ml滤液移于100ml三角瓶中，加10ml菲林试剂，在沸水浴上放置10min,冷却至室温后再加3ml 33％KI溶液和4ml H2SO(1:3)。然后用0.1N Na2S2O3滴定，至终点前加淀粉指示剂，再滴定至蓝色消失。试验应设以水（20ml） 代替基质的对照。 淀粉酶活性（单位NH2-N mg/100g干土，37℃，96h）是用硫代硫酸钠溶液滴定的方法测定。其活性以96小时后单位土重所消耗的0.1N硫代硫酸钠溶液的毫升数表示。方法原理：通常以直链淀粉组成的可溶性淀粉为基质，在土壤淀粉酶的作用下，反应产物为还原糖。方法步骤：（1）称取10g过1mm筛的风干土样置于100ml容量瓶中。(2)用1.5ml甲苯处理（加入甲苯的量以能湿润土样为宜），放置15分钟。（3）加基质：注入20ml20％淀粉溶液和20ml0.1mol/L磷酸盐缓冲液（PH=5）并将混合物仔细摇匀。(4)将上述容量瓶置于37℃恒温箱中放置96小时，并每隔24小时摇荡1次，培养结束前1小时，用热至38℃的水将瓶中混合物稀释至刻度（甲苯应浮在刻度以上）。（5）培养结束后将反应混合物用致密滤纸过滤于另一三角瓶中。（6）取20ml 滤液于125ml 三角瓶中，加入10ml 啡啉溶液 和20ml 蒸馏水，将三角瓶置于煮沸的水浴中10分钟，立即放入自来水流下冷却至25℃