常见的有机显色剂.PPT

第八章 分光光度法 (1)光源 　　光源的作用：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够的光强度，稳定。 　　可见光区：钨灯，碘钨灯(320～2500 nm) 　　紫外区：氢灯，氘灯(180～375 nm) (2) 单色器 　　单色器的作用：从光源的连续光谱中，分出某一波长范围的光，作为吸光光度分析的光源。 棱镜：玻璃350～3200 nm，石英185～4000 nm； 光栅：波长范围宽，色散均匀，分辨性能好，使用方便 棱镜：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同 入射狭缝 准直透镜　 棱镜　　聚焦透镜 出射狭缝 白光 红 紫 λ1 λ2 800 600 500 400 棱镜分光示意图 M1 M2 出射狭缝 光屏 透镜 平面透射光栅 光栅衍射示意图 光栅工作原理： 利用光通过光栅时 发生衍射和干涉现象而分光。 (3) 吸收池（比色皿） 　　比色皿用于盛参比溶液和被测试液。一般为长方形。同样厚度比色皿之间的透光率相差应小于0.5%。 　　玻璃 — 能吸收紫外光，仅适用于可见光区 　　石英 — 不吸收紫外光，适用于紫外和可见光区 (4) 检测器 　　利用光电效应，将光能转换成电流讯号。常用的是：光电池，光电管，光电倍增管。 (5)检流计 　　低档仪器：刻度显示；中高档仪器：数字显示，自动扫描记录。 硒光电池 红敏管 625-1000 nm 蓝敏管 200-625 nm 光电管 　　国产72型分光光度计，是目前实验室中普遍使用的单光束分光光度计，由磁饱和稳压器、单色光器和检流计组成。 722型分光光度计结构方框图 光源 吸收池 检测系统 分光系统 显示系统 单光束分光光度计 特点： 使用时来回拉动吸收池→移动误差对光源要求高，比色池配对。 结构简单，价格便宜。主要适用于定量分析，不适用于作定性分析。 分光光度计工作原理演示（点击播放） 2．双光束分光光度计 特点：不用拉动吸收池，可以减小移动误差，对光源要求不高，可以自动扫描吸收光谱。 双光束分光光度计是自动比较了透过参比溶液和样品溶液的光的强度，它不受光源（电源）变化的影响。 双光束分光光度计还能进行波长扫描，并自动记录下各波长下的吸光度，很快就可得到试液的吸收光谱。所以能用于定性分析。 光源 单色器 单色器 检测器 切光器 狭缝 吸收池 双光束双波长分光光度计 3．双波长分光光度计 特点：利用吸光度差值定量消除干扰和吸收池不匹配引起的误差 双波长分光光度法： ?2 ?1 X A ? Y ∵ ∴ Y 的存在不干扰 X 的测定 显色反应及其影响因素 一、显色反应和显色剂 1、显色反应　　 　　在光度分析中将试样中的待测组分转变成有色化合物的反应叫显色反应。 　　显色反应一般分为两大类：一类是配位反应；另一类是氧化还原反应。 Fe3＋ ＋ SCN－ = FeSCN－； Mn2＋ － 5e ＋ 4H2O = MnO4－ ＋ 8H＋ 在这两类反应中，用得较多的是配位反应。　　 2、显色剂　　 　　与待测组分生成有色化合物的试剂叫显色剂。分为无机显色剂和有机显色剂两大类。 (1) 无机显色剂 　　无机显色剂生成的络合物不够稳定，灵敏度和选择性也不高。 (2)有机显色剂 　　大多数有机显色剂常与金属离子生成稳定的螯合物，显色反应的选择性和灵敏度都较高。有些有色螯合物易溶于有机溶剂，故可进行萃取比色，进一步提高测定的灵敏度和选择性。有机显色剂的种类极其繁多。 3、常见的有机显色剂： ①磺基水杨酸 　　磺基水杨酸 可与很多高价离子生成稳定的螯合物，主要用于测定Fe3+。 ②丁二酮肟 　　在NaOH碱性溶液中，有氧化剂存在时，试剂与Ni(IV )生成可溶性红色络合物。λmax= 470 nm， ε= 1.3×104 OH COOH SO 3 H 磺基水杨酸 CH3－C－C－CH3 HO－N N－OH ＝ ＝ 丁二酮肟 ③1，10-二氮菲 　　是目前测定微量Fe3+的较好试剂。用还原剂先将Fe3+还原为Fe2+，然后在pH=3－9的条件下，Fe2+与试剂作用，生成稳定的桔红色络合物。λmax= 508 nm，ε= 1.1×104。 ④二苯硫腙 　　是目前萃取比色测定Cu2+、Pb2+、Zn2+、Cd2+、Hg2+等很多重金属离子的重要试剂。控制酸度及加入掩蔽剂，可以消除重金属离子之间的干扰，提高反应的选择性。 N N 邻二氮菲 N H N H N S N 二苯硫腙 4、显色反应一般应满足下列要求： 　　①选择性好，干扰少，或干扰容易消除； 　　②灵敏度足够高。吸光光度法一般用于微量组分的测定，故显色反应的摩尔吸光系数要大； 　　③有色化合物的组成恒定，符合一定的化学式； 　　④有色化合物的化学性质应足够稳定； 　　⑤有色化合物与显色剂之间