精液PH值密度检查.PPTVIP

畜禽繁殖技术;学习目标;一、家禽精液的成份 家禽的精液是由精子和精清组成。精清是精细管、附睾和输精管的分泌物，同时还混入透明液。透明液还含有提高精子活力、呼吸和葡萄糖消耗因子，其促使精子早衰，故采精时，应尽量避免透明液混入精液。 精液品质的测定主要根据畸形检查、外观检查、精液PH值、密度检查、活力检查等指标进行测定质量的好坏。;二、家禽精液品质鉴定 1.肉眼检查 （1）颜色 正常精液为乳白色不透明液体；混入血液为粉红色；被粪便污染为黄褐色；尿酸盐混入时则呈粉白色棉絮状；过量的透明液混入则有水泽状；凡受污染的精液品质急剧下降,受精率不会高。;（2）气味：稍带有腥味 （3）采精量：正常在0.2～1.2ml。鸡通常一次射精量为0.3～0.5ml,火鸡为0.2～0.3ml,鸭为0.1～0.2ml,鹅为0.2～1.5ml。 （4）浓稠度：浓稠度很大。精子密度鸡17～35亿/ml,火鸡80～90亿/ml，鸭2～60亿/ml,鹅3～25亿/ml。;（5）pH值：呈弱碱性，其PH值，鸡的为7.0～7.6，鹅稍低为6.9～7.4。 一般新采集的精液PH接近中性。 PH值偏低即弱酸性环境，精子呼吸作用、糖酵解作用也降低，精子活动受到抑制； PH值偏高即弱碱性环境，呼吸作用、代谢活动及精子运动都增强，耗费能量多，容易死亡； 在精液保存时，常加入一些缓冲剂，如柠檬酸盐，磷酸盐以维持弱酸性，防止PH值改变。;2.镜检观测 主要包括精子活力、密度及精子形态等。 （1）活力 采精后20~30分钟内进行，取精液及生理盐水各一滴，置于载玻片一端混匀，放上盖玻片。用平板法在37℃条件下用200～400倍显微镜检查，评定活力的等级，分为1、0.9、0.8、0.7、0.6…级。转圈运动或原地摆动的精子，都没有受精能力。活力高、密度大的精液呈旋涡翻滚状态。;（2）密度检查 ①红细胞计数板计数法 用红细胞计数法测定。取红细胞计数吸管，吸取精液0.5处，在吸入3%的NaCl或2%伊红溶液至101处为200倍稀释，摇匀至2～3分钟，去掉前面的3滴，在计数板盖玻片上下各滴1/2滴，滴入血细胞计数板静置2～3min,进行计数。; 1ml精液的精子总数=5个中方格精子数/80（小方格）×10（计数室格高度）×400（计算小方格）×200（稀释倍数）×1000（1ml等于1000mm3）。 C=n/100(C为精子总数，以10亿/ml表示；n为5个中方格的精子数)。;②估测法 密度浓：显微镜下整个视野布满精子，几乎 无空隙，40亿以上/ml； 中等密度：精子距离明显，20~40亿/ml； 密度稀：精子间有很大空隙，20亿以下/ml。;（3）畸形检查 取精液一滴于玻片上抹片，自然干燥后用95%酒精固定1~2分钟冲洗，再用0.5%龙胆紫或红蓝墨水染3分钟冲洗，干后镜检，300~500精子中有多少个畸形精子。;3.生物化学检查 （1）精子呼吸强度测定 精子呼吸强度与精子密度和活力有关，通常采用美兰褪色试验测定。精子在美兰溶液中，呼吸时氧化脱氢，美兰获得氢离子后便是蓝色还原为无色。因此，根据美兰褪色时间可测知精液中存活精子数量的多少，判定精子的活力和密度的高低。;（2）精液果糖分解的测定 精液果糖分解能力与精子活力密切相关，因此可作为精子活率评定的指标。精液中精子代谢时消耗精液中的游离果糖和磷酸果糖。 ;（3）精液耗氧量测定 精子呼吸时消耗氧气多少与精子活力和密度有关，但精液耗氧量不仅取决于精子细胞内氧化，而且也受精清耗氧量所致。将一定量精液放在37℃温箱中孵化一时，用瓦（勃）氏呼吸器测定其耗氧量，计算出精子的耗氧量。;（4）精浆中其它化合物的测定 测定精浆中其它化合物如透明质酸、谷草转氨酶、酸性磷酸酶、柠檬酸、镁、锌、甘油磷酸胆碱、肉毒碱、精氨酸、精液素、类固醇激素和前列腺素等，有助于全面了解精液的品质和动物的繁殖能力。;4.细菌学检查 精液无菌是保障人工授精的基础，精液在采集、生产和贮存过程中，不可避免的要接触一些细菌，因此，在精液生产中精液的细菌学检验和控制就十分重要。 ; （1）无菌条件下，取新鲜或解冻后的细管精液，一支细管精液接注一个灭菌平皿内，并倒入50℃的培养基约15ml，转动平皿使精液、培养基混合均匀，凝固后翻转平皿并置于恒温箱37℃培养，48小时后计算每个平皿内菌落数，取两个平皿的平均值。 （2）每样品做两个平皿，并设立一个空白对照平皿。;实践活动;课堂练习;二、判断题 1.精子畸形鉴定是取一滴精液于玻片上抹片，自然干燥后用75%酒精固定1~2分钟冲洗，再用0.5%龙胆紫或红蓝墨水染3分钟冲洗，干后镜检300~500精子中有多少个畸形精子。 （X） 2.活力高、密