布地奈德对鼻息肉上皮细胞GR-a表达的作用.pdfVIP

布地奈德对鼻息肉上皮细胞GR-α表达的影响 中 文 摘 要 目的：探讨糖皮质激素（Glucocorticoid，GC ）-布地奈德对鼻息肉上皮细胞增殖 及上皮细胞中糖皮质激素受体-α （Glucocorticoid Receptor-α, GR-α）表达的影响。 方法: （1）将手术中取下的新鲜鼻息肉标本一分为二，一份放于10%福尔马林 液中固定，包埋，石蜡切片，通过免疫组化方法，检测鼻息肉上皮细胞中GR-α 的表达与分布。另一份采用0.1%胶原酶Ⅳ消化法进行上皮细胞原代培养及纯化， 应用相差倒置显微镜对鼻息肉上皮细胞进行形态学初步鉴定；并用鼠抗人细胞角 蛋白-19细胞免疫组化染色法对鼻息肉上皮细胞进行鉴定。（2 ）在含有不同浓度 的布地奈德培养液中培养鼻息肉上皮细胞，每天显微镜下观察，通过细胞计数试 剂盒（Cell Counting Kit-8，CCK-8 ）检测不同浓度的布地奈德对鼻息肉上皮细胞 增殖的影响，并通过反转录聚合酶链反应方法，将电泳凝胶上的条带置于凝胶图 像分析系统分析，检测鼻息肉上皮细胞中GR-α mRNA定量表达。 结果： （）免疫组织化学染色显示 在鼻息肉组织中均有表达，主要表达 1 GR-α 于鼻息肉黏膜上皮，腺体内皮细胞及炎症细胞中，以细胞浆为主。GR-α 免疫反 应阳性产物为胞浆内褐色沉淀物，平均光密度值是（ ± ）。（ ）布地 0.361 0.009 2 奈德浓度为 ～ -8 mol/L 的无血清培养液中，鼻息肉上皮细胞形态无明显改 0 5×10 变，布地奈德浓度为 -7 ～ -6 的无血清培养液中，鼻息肉上 1×10 mol/L 1×10 mol/L 皮细胞随时间延长和浓度增加而逐渐皱缩变形。鼻息肉上皮细胞在浓度为对照组 -8 -8 -7 -7 ， ， ， ， =0 mol/L A=1×10 mol/L B=5×10 mol/L C=1×10 mol/L D=5×10 mol/L 和 E=1×10-6 mol/L 的布地奈德培养液中分别培养 48 h 后的平均存活率分别为 100%，（96.573 ±3.920)% ，（96.559 ±3.101)% ，（89.215 ±1.198)%，（52.833 ± 和（ ± 。与对照组相比， 组和 组鼻息肉上皮细胞存 0.125)% 29.284 0.311)% A B 活率均无明显变化，差别均无明显统计学意义（ ﹥ ）； 组鼻息肉上皮细 P 0.05 A 胞存活率与 组相比，差别无明显统计学意义（ ﹥ ）；鼻息肉上皮细胞平 B P 0.05 均存活率对照组﹥ 组﹥ 组﹥ 组（P ）。（ ） 组、 组、 组、 C D E 0.05 3 0 h 6 h 12 h 组和 组 表达水平分别为（ ± ）、（ ± ）、 24 h 48 h GR-α mRNA 1.196 0.090 0.778 0.053 （ ±