康心汤对雄性充血性心力衰竭大鼠血浆TNF-α和睾酮影响.pdfVIP

贵m中医学院颂Ij学位论文 正 文 l实验材料 1．1 药物康心汤药物组成为人参、黄芪、麦冬、五味子、淫羊藿。所有生药 均购自贵阳中医学院第二附属医院中药房。由该院制剂室制备水煎剂，生药含量 为lg／ml，4℃冰箱保存备用。盐酸阿霉素(ADR)lOmg／支，浙江海正药业股份 有限公司生产，批号060901。 1．2实验动物健康雄性SD大鼠50只，体重220±309，由重庆腾鑫生物技术有 限公司提供。饲料为标准合成大鼠饲料，山贵阳医学院实验动物中心提供。大鼠 分笼常规饲养，自由饮用自来水，控制自然光照，按时通风，定时更换挚料，消 毒笼具，保持环境清洁、安静，避免过多噪音及其它干扰。 解放军总医院科技丌发中心提供。 1．4主要试验仪器及设备 电子天平，余姚市金诺天平仪器有限公司生产； 放免计数仪(GC一1200型)，科大创新股份有限公司中佳分公司生产，贵阳中 医一附院病理科提供； 低速冷冻离心机(KDC一2044型)，中国科学技术大学科技实业总公司中佳光 电仪器分公司生产，贵阳中医一附院病理科提供； Leitzl512型病理组织切片机，德国生产，贵阳中医二附院病理科提供； LeicaQWin组织切片计算机图象分析系统，德国Leica公司生产，贵阳中医 二附院病理科提供； Labsystems微量移液器，芬兰生产，贵阳中医一附院病理科提供。 2方法与结果 2．1实验方法 2．1．1动物分组取50只体重为220±309的雄性SD大鼠适应性喂养1周后，随机 取9只作为正常对照组，其余41只归为模型组。造模成功后，再将造模组其余大 鼠随机分为模型对照组、西药对照组和康心汤组。 2．1．2动物造模及证实造模方法：腹部剪毛，碘酒、75％酒精消毒，实验左手 固定大鼠于仰卧位，右手拿注射器，将针头在下腹部腹白线稍偏左侧(或右侧) 贵阳中医学院顾lj学位论文 的位置，从下腹部朝头方向几乎平行地刺入皮肤，针头刺入皮肤后进针3fnHl左右， 接着使注射针与皮肤呈45。角刺入腹肌，穿过腹肌进入腹腔，当针尖穿过腹肌进 入腹腔后抵抗感消失。固定针头，回抽针栓，如无I--h缸、肠液和尿液后即可注射 药液h1。参照徐叔云晴3《药理实验方法学》所述方法，将10mg／支规格的注射，}j阿 霉素用灭菌注射用水5mL溶解，再用O．9％生理盐水稀释成阿霉素浓度为0．8mg／mL t、 的溶液。第l、3、5周，按3mg／kg的剂量，第2、4、6N，按2mg／kg的剂量，对 除『F常对照组外的大鼠进行阿霉素腹腔注射，J下常对照组大鼠同时腹腔注射等量 生理盐水，每周一次，连续注射给药6周。 证实造模是否成功：从外观上观察，造模组31只大鼠在注射3次阿霉素期后 均陆续出现不同程度的活动减少、体重下降、毛色枯槁、厌食、便溏等症状；随 着注射次数增加，症状逐渐加重，一般状态差，活动度明显下降，进食及饮水量 明显减少，出现呼吸急促、肢体水肿及腹水，具备CflF的临床表现，可初步证明 造模成功。为进一步证实造模是否成功，模型组组术次阿霉素给药24h后，随机 选取『F常组大鼠1只、模型组大鼠2只，断头处死，取出心脏，用预冷9％生理盐水 冲洗，取左室心肌部分，以10％甲醛固定，HE染色，光镜下观察确认，以在模型 对照组观察到心肌细胞CHF相关病理改变为造模成功的进一步依据。 2．1．3给药方法确认造模成功后，按以下方法进行药物干预。参照黄继 汉阳1所述，康心汤用药量按以人／鼠公斤体重的等效剂量折算。 正常对照组：灌No．9％生理盐水10ml／kg，每日上午灌胃一次，连续灌胃4周。 模型对照组：灌服0．9％生理盐水10ml／kg，每R上午灌胃一次，连续灌m．．4周。 西药对照组：灌服卡托普利混悬液，按7．05mg／kg用0．9％生理盐水配制，生 理盐水用量按10ml／kg，每F1上午灌胃一次，连续灌胃4周。 康心汤组：灌服康心汤煎剂，按8．0ml／kg(即生药量8．09／kg)每R上午灌胃 一次，连续灌胃4周。 灌胃操作：按照邹移海《实验动物学》所述左手握住大鼠背固定大鼠，使大 鼠伸开两前肢，腹部向上。右手持灌胃针，沿体壁用灌胃针测量口角至最后肋骨 之问的长度，作为插入灌胃针的深度。然后将灌胃针经口角插入口腔，用灌胃针 压其舌根部，使口腔与食管成一直线，再将灌