白细胞介素24抑制胶质瘤细胞生长和对放疗敏感性影响的实验研究.pdfVIP

中文摘要 白细胞介素24抑制胶质瘤细胞生长及对 放疗敏感性影响的实验研究 摘 要 脑胶质瘤的治疗仍是目前神经外科学界的难题之一。尽管近些年来在 手术、放疗、化疗等方面不断取得进步，然而几十年来胶质瘤的平均生存 期并没有明显改观。分子生物学、遗传学的进步促进了恶性胶质瘤基因治 越来越受到广泛关注，IL．24属于白介素10细胞因子家族，因最初被发现 在终末分化的人类黑色素瘤中高度表达，也被称为黑色素瘤分化相关因子 ·7(mda-7)基因。 研究证实IL．24对肺癌、前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌等多种 癌细胞均有选择性的抑制作用。进一步的研究发现，将IL．24基因转染人 非小细胞肺癌的细胞后，肿瘤细胞对放射治疗的敏感性得到明显增强；将 IL．24基因转染入人乳腺癌细胞，可明显增强肿瘤细胞放、化疗的治疗作 用。 在本研究中我们用新型重组腺病毒作载体携带IL．24基因 组织，观察IL．24基因对胶质瘤细胞的影响以及IL．24与放射治疗联合应 用是否相互协同增效，并探讨其可能的作用机制。 第一部分白细胞介素24抑制胶质瘤细胞生长的实验研究 目的：观察IL．24基因对裸鼠在体人胶质瘤的生长是否存在抑制作用， 并初步探讨其作用机制。。 察肿瘤的生长情况。通过WesternBlot方法检测肿瘤组织中IL．24蛋白、 促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl．2的表达情况；通过原位缺口末端标记 技术检测肿瘤组织的凋亡情况；通过免疫组织化学染色检测肿瘤组织的血 管密度，以及bFGF、VEGF的表达情况。 结果：AdSF35．IL24转染U25l胶质瘤后IL．24蛋白高度表达，统计 学分析显示实验组肿瘤组织和对照组相比较：肿瘤的生长受到明显抑制(尸 中文摘要 O．05)。 结论：IL．24具有抑制胶质瘤生长的作用，诱导胶质瘤细胞凋亡和抑 制胶质瘤微血管生成可能是其主要的作用机制。进一步的研究表明促凋亡 IL．24抑制胶质瘤微血管生成的作用机制。 第二部分放射性粒子125I抑制胶质瘤细胞生长的实验研究． 目的：探讨放射性粒子125I在动物体内抗人胶质瘤的效果及其作用机 制。 方法：建立人胶质瘤U251的动物模型，瘤内植入放射性粒子125I，观 察肿瘤生长情况，在电镜下观察其超微结构的变化，采用原位缺口末端标 记技术检测肿瘤组织的凋亡情况，流式细胞仪检测Bax、Bcl．2的表达，并 应用免疫组织化学染色检测血管密度和VEGF、bFGF的表达。 结果：人胶质瘤细胞U25 1的动物模型成功完成，植入放射性粒子125I 后，胶质瘤生长较对照组明显受到抑制，电镜下可呈现核碎裂，核染质边 ±0．89)低于对照组(3．52±0．79)，P0．05。 结论：放射性粒子眩5I对在体人胶质瘤U251有明确的抑制作用，促进 瘤细胞凋亡和降低瘤组织微血管密度是其主要作用机制。 第三部分白细胞介素24对胶质瘤细胞放疗敏感性影响的实验研究 联合应用是否可协同抑制胶质瘤生长，并探讨其可能的作用机制。 2 中文摘要 Blot分析各组U25 干预在体的胶质瘤组织，通过TUNEL法测定各组肿瘤组织的凋亡情况， 通过流式细胞仪检测各组肿瘤组织的Bcl．2和Bax蛋白的表达情况，通过 ，免疫组织化学染色检测各组肿瘤组织的血管密度，以及各组肿瘤组织 bFGF、VEGF的表达情况。 结果：体外实验发现联合干预组U251细胞的抑制率和凋亡率均明显 达和活化都明显增高(PO．001)；体内实验结果同样证实同其余各组相 0．001)。同时还发现发现联合干预组的微血管生成较其余组明显减少(尸 O．05)，VEGF和bFGF的表达也明显减少(尸O．05)。 结论：无论在体内外，IL．24和放射治疗对U251胶质瘤细胞均具有协 同杀伤作用，推测其机制可能是通过使Bax／Bcl．2升高而诱导了U251胶质 瘤细胞的凋亡。此外，联合治疗还可协同抑制胶质瘤组织中VEGF和bFGF 表达，从而抑