白藜芦醇对膀胱癌T24细胞的作用和其机制的实验研究.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………………………………l 英文摘要………………………………………………………………………3 研究论文 白藜芦醇对膀胱癌T24细胞的作用及其机制的实验研究 前言………………………………………………………………………5刖舌………………………………………………………………………5 材料与方法………………………………………………………………6 结果……………………………………………………………………．。12 附图……………………………………………………………………．．13 附表………………………………………………………………………19 讨论……………………………………………………………………．．22 结论……………………………………………………………………．．24 参考文献………………………………………………………………．．25 综述白藜芦醇在肿瘤基因调控中作用的研究进展……………………．．27 致谢…………………………………………………………………………．．33 个人简历……………………………………………………………………．．34 中文摘要 白藜芦醇对膀胱癌PTEN基因调控作用的实验研究 摘 要 目的：近年来生物治疗成为肿瘤治疗的一种新模式，其中基因治疗是 肿瘤生物治疗的热点，其中通过药物对肿瘤相关基因的调控也逐渐引起大 家的关注，膀胱癌是严重影响人类健康的疾病之一。本研究从细胞分子水 平研究白藜芦醇对人膀胱癌细胞株T24增殖及凋亡的影响作用，并进一 步探讨白藜芦醇对膀胱癌细胞的作用机制，为膀胱癌的治疗寻找新的有效 药物。 方法： l采用MTT法分析不同浓度白藜芦醇对T24细胞作用不同时间后，观察 白藜芦醇对T24细胞株增殖反应的影响。 2用不同浓度白藜芦醇分别处理T24细胞48h后，采用瑞吉染色技术光 学显微镜、透射电镜观察细胞的形态学变化。 3用不同浓度白藜芦醇分别处理T24细胞48h后，利用流式细胞技术检 测细胞的周期分布和凋亡情况。 mRNA的表达水平的变化。 。 结果： ． 1 MTT分析结果：与对照组相比，不同浓度的白藜芦醇作用于T24细胞 8．3％，3 39．6％；509mol／L依次为1 作用的时间越长，抑制效应越明显，白藜芦醇对T24细胞的生长抑制作 用呈时间和剂量依赖性。 2形态学变化：透射电子显微镜和瑞吉染色后光镜观察发现白藜芦醇作用 于肿瘤细胞后，可诱导典型的细胞凋亡形态的变化和超微结构改变，如部 分细胞膜向外呈球形膨出；核染色质浓缩，体积缩小，电子密度增加，边 中文摘要 集于核膜下，厚薄不均匀；核碎裂，核膜破裂，核质溢出到细胞质内，形 成许多核碎片。倒置显微镜下观察到白藜芦醇作用后细胞生长明显被抑 制，细胞体积缩小，胞质空泡变性，部分细胞变圆悬浮在培养基中，胞浆 内可见颗粒增多增粗。 3流式细胞术检测结果：白藜芦醇处理T24细胞后，使G0／G1期细胞比 后，使细胞凋亡率分别达到3．85％、13．86％，与空白对照组的1．67％相比， 差异同样具有显著性(P0．01)。且随浓度增加，G0／G1期细胞比例增多， 凋亡率也随之升高，不同浓度间比较差异也具有统计学意义(P0．01)。 mRNA的表达上调，且随 4半定量RT-PCR结果显示白藜芦醇能使PTEN 着药物浓度增加，PTENmRNA的表达逐渐增强，呈浓度依赖性。实验组 与空白对照组比较以及不同浓度间比较，PTENmRNA的表达差异均具有 显著性(尸如．01)。 ‘ 结论： 1白藜芦醇在体外能明显抑制膀胱癌细胞T24增殖。 2白藜芦醇对食管癌细胞T24细胞的抑制作用可能与其能诱导细胞凋亡 和阻滞细胞周期于GO／Gl期有关。 3白藜芦醇的抗癌作用还可能与其能上