珍稀濒危树种毛红椿微卫星DNA分离及SSR反应体系优化.pdfVIP

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2017-10-18 发布于河北
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珍稀濒危树种毛红椿微卫星DNA分离及SSR反应体系优化.pdf

China B iotechnology, 2006, 26( 12): 50~ 55 DNA SSR* 1 2 1** 1 1 刘军孙宗修陈益泰何贵平吴天林 ( 1 311400 2 310006) 以江西宜丰种源毛红椿为材料, 成功提取其基因组 DNA利用改良的链亲和素磁法亲和捕捉出毛红椿基因组微卫星 DNA片段,并构建了富含微卫星的基因组文库从构建的基因组文库中随机挑选了 63 个单克隆进行测序, 其中50 个单克隆成功测序, 含有微卫星的单克隆有 18 个,并根据测序结果设计并合成 SS 引物 18对利用所合成的引物优化 SS 反应体系, 对影响 SS 反应的各个因子进行了探讨确定了模板 DNA 最适浓度为 30ng; dNTP的最适浓度为 0. 3mmol/L; 0. 3Lmol/L是引物在反应体系中的最合适浓度建立了重复性好稳定性好的 SS 反应体系, 为下一步进行毛红椿群体遗传结构和遗传变异研究提供了技术支持毛红椿微卫星链亲和素磁 SS 反应体系 Q819 [T oona cilia ta var. pubescens ( Franch. ) , Hand. ], [ 5, 6] [ 1] , ,, / 0, DNA, ,,, DNA , , ,, , DNA( DNA) [ 2, 3] [ 4] 0. 04% ~ 12% , , DNA , , [ 7] , , : ( 1) DNA ( single sequence DNA ; (2) DNA repeat, SS ), 1~ 6 SS ; ( 3) DNA , SS , SS [ 4] , SS DNA , 1 : 2006-07-28 : 2006-10-24