温度和pH对澳洲宝石鱼消化酶活性的影响.PDFVIP

维普资讯 第21卷第2期 大 连 水 产 学 院 学 报 Vo1．21No．2 2006年6月 JOURNALOFDALIANFISHERIESUNIVERSITY Jun．2006 · 研究简报 · 文章编号：1000-9957(2006)02-0189—04． 温度和pH对澳洲宝石鱼消化酶活性的影响 沈 文英，祝 尧 荣，钱 科 亮 (绍兴文理学院生命科学学院，浙江绍兴312000) 摘要：通过改变酶反应温度和pH，分析了澳洲宝石鱼Scortumbarcoo淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶活性的 变化。结果表明，澳洲宝石鱼肝胰脏、肠道、胃淀粉酶的最适 pH均为6．2；肝胰脏、肠道蛋白酶的 最适pH分别为7．5、7．0—7．5，胃蛋白酶的最适 pH为2．0。说明淀粉酶在中性偏酸性时活性最高， 肝胰脏、肠道蛋白酶在中性偏碱性时活性最高，而胃蛋白酶在强酸性时活性最高。肝胰脏、肠道、胃 的淀粉酶的最适温度均为30~C，脂肪酶的最适温度分别为柏 、35、35~C，蛋白酶的最适温度分别为 5O、50、40~C。在一定温度和pH范围内，3种消化酶的活力均呈先上升后下降的趋势，并在各 自最 适的温度下，3种消化酶比活力的大小均为肠道)胃肝胰脏。 关键词 ：澳洲宝石鱼；消化酶活性；温度；pH 中图分类号：$917；$965．123 文献标识码：A 澳洲宝石鱼Scortumbarcoo(以下简称宝石鱼)属于鲈形 目、鳕科、革蜊属。该鱼具有生长速度 快、抗病性强、出肉率高、营养价值高等特点，在澳大利亚、日本、韩国、香港、东南亚以及欧盟等 地非常受欢迎。青岛现代农业开发中心于2001年首次从澳大利亚引进这一鱼种，并对该鱼的生物学 特陛和养殖技术等进行了研究…。目前国内外学者关于温度和pH对鱼类消化酶活性影响的研究报道 较多L2]，但对宝石鱼消化酶活性的研究尚未见报道，为此，作者分析了不同温度和pH对宝石鱼主 要消化酶活性的影响，以期为宝石鱼的消化生理学和饲料配伍提供基础数据和理论依据。 1 材料与方法 1．1 试验材料和样品制备 宝石鱼由浙江省绍兴县绿神农场提供。选取健康宝石鱼共 l6尾，体重为 (248．0±12．0)g，体 长为 (20．4±0．8)cm，每次取样8尾，重复2次。参照刘玉梅等 的方法制备酶粗提液。 1．2 方法 采用0．2mol／L磷酸氢二钠一柠檬酸钠缓冲液调节pH，用恒温水浴锅调节反应温度。 1．2．1 淀粉酶活力的测定 采用以可溶性淀粉为底物的3，5一二硝基水杨酸显色法。淀粉酶酶活性 定义为：在一定pH和温度下，每分钟催化淀粉生成 1mg麦芽糖为一个酶活力单位 (rag／rain)。在 25℃下，将pH从 5．2～8．7，以0．5为幅度，设置成8个pH梯度，分别测定不同pH时的酶活力； 在pH6．9下，将温度设计为20、25、30、35、40~C，分别测定不同温度时的酶活力。 1．2．2 脂肪酶活力的测定 采用以聚乙醇烯橄榄油为底物的标准氢氧化钠溶液滴定法。脂肪酶酶活 性定义为：在一定pH和温度下，每分钟催化产生1p,mol脂肪酸为一个酶活力单位 (p,mol／min)。在 pH7．5下，将温度设计为25、30、35、40、45cI=，分别测定不同温度时的酶活力。 1．2．3 蛋白酶活力的测定 采用以酪蛋白为底物的福林 ～酚试剂显色法。蛋白酶酶活性定义为：在 收稿 日期：2005-05-09 作者简介：沈文英 (1970一)，女。硕士，副教授。E—mail：∞0l嘴，@∞c峨edu．ca 维普资讯 190 大 连 水 产 学 院 学 报 第2l卷 一 定pH和温度下，每分钟水解酪蛋白产生I g酪氨酸为1个酶活力单位 (txg／min)。在40~C下。将