地高辛逆转乳腺癌CF-7阿霉素细胞的耐药性及其机制.PDF

生理学报Acta Physiologica Sinica , December 25, 2015, 67(6): 611–617 611 DOI: 10.13294/j.aps.2015.0075 研究论文 地高辛逆转乳腺癌MCF-7/阿霉素细胞的耐药性及其机制 李伯和，袁磊，时冉冉，王建国* 漯河医学高等专科学校分子医学实验室，漯河462002 摘 要：本研究旨在探究地高辛对乳腺癌MCF-7/阿霉素(ADR)细胞耐药性的影响，并探讨其分子机制。将正常培养的MCF-7 MCF-7/ADR ADR (100 nmol/L) 48 h MCF-7/ADR ADR + digoxin 和 细胞分别设为对照组和 组；经地高辛 处理 后的 细胞为 组；用 shRNA技术沉默HIF-1α基因的MCF-7/ADR细胞为shHIF-1α组，并设置对照组为shcontrol组。采用CCK-8法检测ADR 的细胞 IC RT-PCR -1α (HIF-1α) 1 (multidrug resistance-1, MDR1) 毒作用，以测定 与耐药指数；用 法检测缺氧诱导因子 和多药耐药基因 50 的mRNA水平；用Western blot方法检测HIF-1α和MDR1蛋白的表达水平；用流式细胞术检测细胞凋亡。结果显示，ADR组细 胞对ADR 的耐药指数高达115.6，地高辛使其耐药指数下降至47.2 (P 0.05) ；ADR组细胞中HIF-1α与MDR1 的mRNA和蛋白 ( P 0.05) ADR HIF-1α MDR1 MDR1 mRNA 水平均高于对照组细胞均 ，而地高辛可显著降低 组细胞 与 的蛋白水平，以及 的 水平 (P 0.05) ，但对HIF-1α 的mRNA水平无明显影响；经shRNA干扰HIF-1α基因表达后，HIF-1α和MDR1 的蛋白水平均显著降低 (P 0.05) ；沉默HIF-1α 基因能显著增强ADR对ADR组细胞的促凋亡作用(P 0.05) 。地高辛可有效地诱导shcontrol组和 shHIF-1α组细胞凋亡(P 0.05) ，但二组之间无显著差异。以上结果提示，地高辛可通过下调HIF-1α蛋白表达从而在转录水 平抑制MDR1 的表达，也可通过不依赖HIF-1α 的通路诱导MCF-7/ADR细胞凋亡，进而在一定程度上逆转MCF-7/ADR细胞的 耐药性。 MCF-7/ADR -1α 1 关键词：地高辛； 细胞；缺氧诱导因子 ；多药耐药基因 ；细胞凋亡 中图分类号：R737.9 Reversal of adriamycin resistance by digoxin in human breast cancer cell line MCF-7/adriamycin and its mechanism * LI Bai-He, YUAN Lei, SHI Ran-Ran, WANG Jian-Guo Laboratory of Molecular Biology, Luohe Medical College, Luohe 462002, China Abstract: The aim of this study was to investigate