人参皂苷Rb1抑制自体静脉移植物内膜平滑肌细胞增生的探究.pdfVIP

摘要 人参皂苷Rbl抑制自体静脉移植物内膜平滑肌细胞增 生的研究 硕士研究生：乔洪武 导 师：徐敬教授 郑州大学第一附属医院心血管外科 河南郑州450052 摘 要 背景与目的 冠脉动脉旁路移植术是治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病(Coronary AtheroscleroticHeart 次将大隐静脉应用于冠状动脉旁路移植术以来，大隐静脉由于具有来源丰富， 口径较大，易于吻合，取材容易且长度充分等特点，成为临床上主要的移植材 料。但种种原因造成的移植静脉再狭窄或闭塞，使移植血管桥的使用寿命受到 了一定的限制，远期疗效并不理想12l。一般来说远期通畅率1年约为80％，5年 约为75％，以后每年的闭塞率为2-4％，10年约为50％13,4l，所以有一部分人需 要接受二次手术。预防移植静脉再狭窄或闭塞成为了研究热点。人参皂苷Rbl 是从人参中提取的单体化合物，是一种钙通道阻滞剂，有明显的阻滞ICa2+电 流的作用，并且能明显抑制MCT(野百合碱)诱导的RVH(右心室肥大)， 具有抗心律失常的作用，还具有显著的抗血管内皮缺氧损伤、抗氧自由基等作 用，有报道称：人参皂苷Rbl可通过减少内膜增生过程中增殖细胞核抗原 CellNuclear (Proliferating Growth smoothmuscle cells，简称VSMCs)的过度增殖，减少细胞外基质的形成和分泌， 起到抑制内膜过度增生、减轻移植血管再狭窄的作用，延长移植静脉的使用寿 命。本实验在建立兔颈外静脉．颈总动脉移植血管桥动物模型的基础上，通过腹 腔注射一定剂量的人参皂苷Rbl成品，观察各组移植静脉内膜厚度和形态的变 摘要 化以及PCNA与TGF-13基因表达的变化，探讨人参皂苷Rbl对移植静脉桥再狭 窄或闭塞的抑制作用及其作用机理，为以后的临床应用提供实验基础和理论依 据。 材料与方法 45只健康纯种新西兰大白兔，雌雄不限，随机分为实验组、模型组、对照 组3组，每组15只。应用“IIO．touch”外科技术获取右侧颈外静脉后，离断右侧颈 总动脉，采用外翻连续缝合方法端端吻合颈外静脉和颈总动脉，建立颈外静脉 和颈总动脉旁路移植的动物模型。4周后，取出移植静脉血管，利用HE染色观 察移植静脉血管内膜形态和厚度变化，并测量内膜厚度，计算内膜／中膜的厚度 比，免疫组化观察静脉移植血管增殖细胞核抗原与转化生长因子．p阳性表达情 mRNA的表达。 况，RT-PCR检测移植静脉血管中PCNA及TGF-p 结果 1移植静脉HE染色结果 石蜡切片HE染色光镜下观察分析结果显示：移植4周后实验组、模型组的 移植静脉内膜均有不同程度的增生重构，模型组更显著，实验组、模型组、对 lam，各组间比较P0．05，有显著差异。三组移植静脉内膜／中膜厚度比分别为 2移植静脉免疫组化染色结果观察 移植4周后实验组、模型组、对照组的移植静脉内膜中均可见到PCNA、 TGF．D阳性细胞表达。实验组、模型组、对照组PCNA阳性表达指数分别是 显著差异；移植4周后实验组、模型组、对照组TGF-13阳性表达指数分别是 明显差异。 n 摘要 3移植静脉RT-PCR结果观察 于实验组和对照组，以目的基因与内参基因的积分光密度比值计算PCNA及 TGF．p的相对含量；移植4周后的实验组、模型组、对照组PCNAmRNA相对 (0．716_+0．003)、(O．539_+0．004)，各组问比较P0．05，有显著差异。 4相关性分析结果 SPSS简单线性模型结果显示： (1)PCNA与移植静脉再狭窄呈正相关，相关系数为0．402。 (2)TGF．p与移植静脉再狭窄呈正相关，相关系数为0．376。 结论 1．PCNA的基因表达与移植静脉再狭窄程度呈正相关。 2．TGF．13的基因表达与移植静脉再狭窄程度呈