聚合酶链式反应在食品中的应用研究.doc

专业文献综述 题 目: PCR技术在食品微生物检测及食品动物 源性中的应用 姓 名: 王威 学 院: 食品科学与药学学院 专 业: 农产品加工及贮藏工程 学 号: 320142190 成 绩： 指导教师: 武运（教授） 新疆农业大学食品科学与药学学院 2015年1月5日 PCR技术在食品微生物检测及食品动物 源性中的应用 作者：王威 指导老师：武运 摘要:随着生活水平的提高，人们对食品的质量与安全更加的关注。人们应用PCR技术，检测食品微生物致病菌及鉴定食品动物源性。多重PCR较之常规PCR,具有快速、准确、高效的特点，但也有其自身的缺陷。随着科学技术的发展，PCR技术也在逐步完善。 关键字：PCR，微生物，动物源性 Abstract：With the improvement of living standards, people pay more attention to the quality and safety of food. People using PCR technology to detect pathogens in food microbiology and identification of food of animal origin. Multiplex PCR compared with conventional PCR, fast, accurate, and efficient features, but also has its own drawbacks. With the development of science and technology, PCR technology has gradually improved. Keywords: PCR, microorganism, animal origin 前言 聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR),是一种体外酶促合成,扩增特定DNA片段的法。该技术于1985年由美国的Kary等首创并由美国Cetus公司开发。PCR技术已成为调查食品源疾病暴发、鉴定相应病原菌及鉴定食品动物源性的有效工具,可以提高检出率、缩短操作时间、提高检测灵敏度,有效检测食品中的致病微生物和鉴定食品动物源性。随着人们对食品安全性要求的不断提高,PCR技术以其灵敏度高、特异性强和快速准确等优点在食品检测及鉴定领域得以广泛的应用。 食品中污染的病原细菌是引起食源性疾病的主要因素之一。据国家食源性疾病监测网的统计资料显示近十年来由微生物引起的食源性疾病事件和涉及人数最多,其中又以大肠杆菌(Escherich coli)、沙门菌(Salmonella)、副溶血性弧菌(Vibrio parahemolyticus)等病原细菌为主要的病原物质[1]。因此,快速地检测与鉴定食品中病原细菌是及时有效控制与预防病原细菌传播、预防食物中毒的有效手段。传统的细菌学培养方法需经富集培养、选择性分离、形态特征观察、生理生化反应、血清学鉴定等过程,操作复杂、耗时费力,而且无法对人工难以培养的病原细菌进行检测[2,3]。随着现代免疫学和分子生物学理论和技术的不断发展,PCR技术因其特异性强、操作简单快速敏感性高、等优点已广泛应用于食品病原细菌的检测中[3,4,5]。 近年来, 以 DNA 为基础的 PCR 技术广泛地被用来鉴定食品中的动物源性, 由于 PCR 方法比较简便, 特异性和灵敏度都很高, 国内外已经运用该技术和其他技术结合建立了多种鉴别动物源性成分的方法[6-8]。对食品、药品以及饲料产品成分进行动物源性鉴定, 已经成为一个特别受人关注的问题。目前所采用的常规检测方法存在许多不足, 如检测灵敏度较低, 检测周期较长。对生鲜肉进行来源种类鉴别, 可采用电泳技术、免疫学技术、光谱技术和层析技术等, 但经过热加工理的肉类, 由于蛋白质成分或其它免疫原性物质被破坏而无法进行。随着生物技术的发展, 以 DNA 为基础的分子生物学技术的产生, 为这些难题的解决提供了办法。由于 DNA 不同于蛋白质, 在各种加工过程中很稳定, 是一个用来鉴定食品中动物产品物种源性的重要依据。 1　常规PCR检测