切口痛大鼠脊髓水平toll样受体4和炎性细胞因子的变化.pdfVIP

摘要 切口痛大鼠脊髓水平toll样受体4及炎性细胞因子的变化 硕士研究生李艳娜 导 师张卫 郑州大学第一附属医院麻醉科 中国郑州450052 摘要 术后疼痛(postoperativepain)又称急性伤害性疼痛，不同于一般的生理性 疼痛，是手术后即刻发生的急性疼痛(通常持续时间不超过7d)，是临床最常见和 最需紧急处理的急性疼痛。文献报道75％以上的患者术后承受不同程度的疼痛， 将导致机体病理生理的改变，产生一系列不良反应，如心率加快、心脏负荷增 加、呼吸浅快、胃肠蠕动减慢、免疫功能下降等，严重影响患者术后的治疗和 生活质量。 目前，对术后疼痛的机制研究主要集中在外周和中枢敏化上，众多研究表 明，炎症因子与术后疼痛关系密切，如炎症因子IL-I[3、IL-6、TNF．Q等能引起 中枢或外周敏化，在术后急性疼痛的发生发展中发挥重要作用。％n样受体4{Toll liIce 在中枢神经系统，主要表达于小胶质细胞和星形胶质细胞，是联系天然免疫和 后天免疫的桥梁。TLR4识别外源性配体如脂多糖(【，PS)或内源性配体如热体 differentiationfactor 克蛋白(HSP)后被激活，通过髓样分化因子88(Myeloid j#依赖性途径，进而介导炎症因子(IL．1 MyD88)依赖性途径或MyD88 p、IL-6、 等在神经病理性疼痛、炎性疼痛模型中研究发现，位于脊髓胶质细胞上的TLR4 及下游细胞因子舞高，其介导的炎症反应在痛觉信号传导过程中发挥关键作用， 但其在术后急性疼痛模型中的作用尚未见报道。 在手术创伤和应激条件下，TLR4可识别内源性损伤相关分子(DAMPs)，如 高迁移率簇蛋白l、热休克蛋白、细胞外基质分解产物等内源性配体，促进细胞 因子的合成与释放，引发无菌性炎症反应，但围术期这种无菌性免疫炎症反应 摘要 是否参与了术后疼痛的形成与发展尚不清楚。在术后疼痛模型中，研究发现脊 髓胶质细胞被激活，主要是由子伤害性信号沿襁级传入纤维至脊髓背角引起， 在该神经传导通路中TLR4是否被激活并不清楚。本研究首次提出了TLR4介 导的炎症反应参与了术厝疼痛的发生发展这一假设。 目的 本研究采用大鼠切口痛模型，观察脊髓水平TLR4mRNA及炎性细胞因子 的作用，从而为术后急性疼痛的治疗寻找新靶点。 材料和方法 l材料 实验动物中心提供。 2方法 按照Brennan等提出的方法建立大鼠切口痛模型，吸入2％异氟醚麻醉后， 在大鼠左后爪从足底近端0．5cm处向趾部作长约lcm的纵行切口，深及皮下筋 膜，然后用眼科镊挑起足底肌肉并做纵向切割，但保持肌肉的起止及附着点的 完整性，按压止血后，用5-0尼龙线缝合皮肤两针，手术切口处给予碘伏消毒并 覆盖抗生素软膏，即完成模型制各。 5d、7d应用电子yon Frey测定大鼠手术侧和非手术侧的机械缩足反应阈值 withdrawal (mechanicalthreshold，MWD。 生化检测：分别在手术前醢、术后强、8h、ld、2d、3d、5d、琵各取6只 大鼠取簇段脊髓(L4．6)，采用荧光定量PCR(Real．TimePCR)方法检测脊髓 TLR4mRNA、IL．I 13mRNA、TNF．amRNA的表达。 II 摘要 结果 l withdrawalthreshold， 切口痛大鼠机械缩足反应阈值(mechanical MWT)的变化 所有大鼠术蘸左右脚MWT基础值无明显差异，手术侧(左脚)术后O。5h