API 20E对致病微生物检测应用.docVIP

API 20E对致病微生物检测应用【中图分类号】R155【文献标识码】A【文章编号】1672-3783(2010)07-0221-02 【摘要】 本实验用API 20E和出入境行业检验标准(SN标准)对65株食品中可疑菌进行检测,总结了API 20E在食品常见致病菌检测中优缺点。 【关键词】API 20E,致病微生物,检测 大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、耶尔森氏菌、霍乱弧菌、副溶血性菌等都是法定检验的致病菌,每一种致病菌都有一套不同的检验标准,对于基层的检验实验室来说,不但操作程序复杂,而且要拥有品种繁多的生化试剂,另外还要耗费漫长的检验时间,如大肠杆菌的检测,按照SN0168-92标准,从开始到最后检出大肠杆菌需要10天左右的时间。 API细菌鉴定系统为国际公认标准(细菌)鉴定系统。本研究用API 20E分别测试大肠杆菌、沙门氏菌、霍乱弧菌、副溶血性菌一些可疑样品,并用出入境行业检验标准的相应标准(SN标准)进行对照试验,总结了API 20E在基层食品实验室检测中的一些经验。 1 样品、材料和仪器 1.1 样品来源 样品来自各进出口公司送检食品中分离得到的可疑菌株,其中可疑大肠杆菌24株,沙门氏菌16株,可疑霍乱弧菌7株,可疑副溶血性弧菌18株。 1.2 SN法鉴定用的培养基和生化试剂均为北京陆桥技术有限责任公司产品。 1.3 API 20E生化反应板及相关试剂为法国生物梅里埃公司的产品。 2 检验依据 2.1 各致病菌SN检验依据 大肠杆菌检验方法:SN0169-92[1]。沙门氏菌检验方法:SN0170-92[2]。霍乱弧菌检验方法:SN/T1022-2001[3]。副溶血性弧菌检验方法:SN0173-92[4]。 2.2 各致病菌API 20E检验依据 API 20E法的操作按厂家规定的操作方法程序执行。 API 20E法检测步骤[5]:(1)从分离平板挑取可疑单菌落制成菌悬液(可疑弧菌的用0.85%的生理盐水,其余的用蒸馏水),按操作说明书指导分别滴加于API 20E试剂条各个微量生化管内,37℃培养24 h±2 h。(2)滴加附加试剂,判断各生化管的反应结果是阳性还是阴性,并转化成相关的读数。(3)API LAB软件分析得出最终结果。 3 结果 API 20E检出大肠杆菌15株,沙门氏菌9株,霍乱弧菌0株,副溶血性弧菌3株; 作者简介:张海艳(1978.12-),女,硕士,主要从事病原微生物教学和研究。 具体检测结果如下: 表1 大肠杆菌阳性样品在API 20E试条中的生化反应结果 API LAB软件分析结果为:大肠杆菌:%id为95.8,T值为0.6,好的鉴定结果。 表2 沙门氏菌阳性样品在API 20E试条中的生化反应结果 ONPG ADH LDC ODC CIT H2S URE TDA IND VP GEL GLU MAN INO - - - + - - - - - - - + + - SOR RHA SAC MEL AMY ARA OX + + - + - + - API LAB软件分析结果为:甲型副伤寒沙门氏菌:%id为99.5,T值为1,很好的鉴定结果。 表3 副溶血性弧菌阳性样品在API 20E试条中的生化反应结果 ONPG ADH LDC ODC CIT H2S URE TDA IND VP GEL GLU MAN INO - - + + - - - - + - + + + - SOR RHA SAC MEL AMY ARA OX - - - - - - + API LAB软件分析结果为:副溶血性弧菌:%id为98.4,T值为0.92,好的鉴定结果。 表4 可疑霍乱弧菌样品(实际为创伤弧菌)在 API 20E试条中的生化反应结果 ONPG ADH LDC ODC CIT H2S URE TDA IND VP GEL GLU MAN INO + - + + - - - - + - + + + - SOR RHA SAC MEL AMY ARA OX - - - - + - + API LAB软件分析结果为:创伤弧菌:%id为99.7,T值为1.00,很好的鉴定结果。 SN法检出大肠杆菌15株,沙门氏菌9株,霍乱弧菌0株,副溶血性弧菌3株;两种检测方法结果完全一致。 4 讨论 通过实验,我们对比了2种不同的检验方法优劣,发现API 20E在基层食品检测实验室的检验存在很大的优势。 优势:1 不需高昂的仪器设备,仅需试剂条和一套软件,基层实