刺五加总黄酮撮技术研究.docVIP

刺五加总黄酮撮技术研究摘要：文章将机械化学法用于刺五加总黄酮的提取，是提取刺五加总黄酮的一种有效方法。 关键词：机械　化学法　提取　技术 一、概述 传统中药刺五加在中医临床上的应用已有悠久的历史，其中的黄酮类化合物具有广泛的药理活性。黄酮类物质的传统提取法如煎煮、浸渍及热回流法等，存在周期长，溶剂用量大的弊端。近些年随着科技的发展，各学科相互渗透，一些新技术已引入黄酮提取的研发中。 目前，国内关于机械化学用于中药提取的研究尚未见报道。本研究主要为了考察机械化学法辅助提取各工艺条件对刺五加总黄酮提取率的影响，通过正交实验优化提取工艺，并与热回流提取对比。 二、仪器与材料 1、仪器 WZJ(BFM)-6J振动研磨机(济南倍力粉技术工程有限公司)；TU-1900双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；FD-ID冷冻干燥机(北京博医康仪器有限公司)；标准分样筛(河南新乡康达新机械有限公司)；LSIOOQ激光粒度仪(美国Beckman Couher公司)。 2、材料 刺五加根及根茎(购自大连开发区大药房，产地吉林，按照《中国药典》鉴定)；芦丁标准品(中国药品生物制品检定所)；其余试剂均为分析纯。 三、方法 1、机械化学法辅助提取 助剂的选择 刺五加中黄酮类物质主要为槲皮素及其相关的黄酮苷类化合物，该类黄酮分子中含有酚羟基，呈酸性，可被碱中和，成盐，使水溶性增加，在常规操作中常采用碱水加热提取。另外，由于此类黄酮分子中的邻二酚羟基结构易被碱破坏，与碱作用时需加硼酸盐保护。根据上述性质，本研究选用Na2C03／Na28407(1：1，W／W)为助剂与刺五加共同研磨。 2、其他提取方法供试品溶液的制备 1)超微粉碎辅助提取 取刺五加粗粉200 g研磨至粒度D95≤44μm。精确称取研磨后的粉末5.0g，加入250ml，75％乙醇，室温(20±3)℃搅拌20min，离心，取上清液，沉淀重复提取2次，合并上清液并浓缩，得浸膏，真空干燥，研碎后加入20ml，95％乙醇，超声充分溶解，过滤，滤液作供试品溶液。 2)物理混合样品的提取 取超微粉碎后的刺五加粉200 g(D95≤44μm)与8.33 g Na2C03／Na28407(占总物料干重的4％，粒度D95≤44μm)均匀混合，精确称取混合后的粉末5.0 g(按生药计)，直接提取，过程同“2.1.2”项。 3)热回流提取 精确称取刺五加粗粉5.0 g，用250ml，75％乙醇回流2h，离心，取上清，沉淀重复提取2次，合并上清液并浓缩，得浸膏，真空干燥，研碎后加入20 ml，95％乙醇，超声充分溶解，过滤，滤液作供试品溶液。 3、含量测定 (1)标准曲线的建立(2)精密度实验(3)回收率实验(4)统计学方 四、结果与讨论 1、不同预处理方法对总黄酮提取率的影响。 刺五加与Na2Co3／Na28407共同研磨后以水为溶剂的提取率比超微粉碎(75％乙醇作溶剂提取)提高15.4％(P0.05)。这表明在本实验条件下，添加8.33gNa2CO3／Na28407(占总物料干重的4％)即可使刺五加中的黄酮类物质与碱充分作用。 2)物料粒度对提取率的影响 随研磨时间延长，物料粒度减小，助剂与目标提取物接触、作用时间越长。粒度由D95≤125μm减小至44μm，总黄酮的提取率提高了64.4％(P0.05)。故物料粒度选用D95≤44μm。 3)乙醇浓度对提取率的影响 机械化学法处理后，刺五加总黄酮在水和稀醇溶液(20％，40％乙醇)中的提取率最高(平均为1.68％)，随乙醇浓度增加，提取率逐渐降低(P0.05)，考虑生产成本和后续处理，料液比取1：50(g：ml)。 3、机械化学法辅助提取与热回流提取对比 按正交实验确定的最佳工艺条件提取刺五加总黄酮，与热回流提取对比。 机械化学法的提取率比热回流提取高13，2％，室温下操作，提取时间由2h缩短到10min，且以20％(V／V)稀醇作溶剂，减少了乙醇用量。 五、结论 本研究将机械化学法用于刺五加总黄酮的提取，最佳工艺条件为Na2C03／Na28407助剂用量为4％(w／w)，物料粒度1395≤37μm，乙醇浓度20％(v／v)，料液比1：60(g：ml)。机械化学法辅助提取明显优于热回流法，提取率提高13.2％，大大缩短提取时间，减少了乙醇用量，无需加热，操作简便，是提取刺五加总黄酮的一种有效方法。本研究为机械化学法在中药提取中的应用提供了参考。 1