去甲氧基姜黄素抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖及迁移及对人肾动脉血管内皮功能的影响.pdfVIP

中文摘要 去甲氧基姜黄素抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖及迁移和对人肾 动脉血管内皮功能的影响 摘 要 第一部分去甲氧基姜黄素抑制人前列腺癌PC．3细胞增殖 目的：本部分通过观察去甲氧基姜黄素(DMC)对PC．3细胞增殖的 影响，探讨DMC抑制PC．3细胞增殖的机制 方法：为了探讨DMC对前列腺癌细胞PC．3的抗增殖作用，将PC．3 细胞用不同浓度的去甲氧基姜黄素(5、10、20、40、80、160 rtM)分别 孵育12、24、36及48 h， 利用流式细胞术(flow Western blot检测了cleaved 3及其底物聚ADP核糖聚合酶(PARP)。 caspase 结果：MTT结果显示细胞的增殖活力较对照组受到明显抑制 (PO．05)。12、24、36及48 cell nuclear rtM。DMC处理组增殖标志物细胞增殖核抗原(Theproliferation 理组G2／M时相细胞比例显著增高，并且随处理时间延长而逐渐增加。同 3 蛋白剪切体及其底物PARP剪切体水平明显增高。 结论：DMC显著抑制PC一3细胞增殖，诱导该细胞G2／M期细胞周期 3通路可能在其中发挥作 阻滞。DMC能够诱导PC．3细胞凋亡，Caspase 用。 第二部分去甲氧基姜黄素抑制人前列腺癌PC．3细胞迁移及侵袭 目的：通过观察DMC对PC．3细胞迁移及侵袭的影响，初步探讨该 药对PC．3细胞迁移及侵袭能力影响的作用机制 中文摘要 方法：采用伤口愈合实验观察DMC对PC。3细胞水平迁移的作用， 明胶酶图分析及RT-PCR检测迁移及侵袭相关蛋白MMP．2的表达变化。 结果：伤口愈合实验结果显示，同对照组相比，DMC处理组(20、 移过程。为此，我们研究了DMC能否影响MMP．2的活性。明胶酶图结 果显示，同对照组相比，DMC处理组MMP．2活性受到抑制。上述结果 表明，DMC能够抑制MMP．2活性，并且这种作用可能参与其抑制PC．3 细胞的迁移和侵袭的机制。 结论：DMC显著抑制PC．3细胞的迁移和侵袭能力，该作用的机制可 能与抑制MMP．2的表达有关。 第三部分去甲氧基姜黄素改善人肾动脉血管内皮功能的研究 目的：探讨DMC对血管内皮功能的影响，并探明该作用的机制。 方法：通过DMC对取白高血压患者和血压正常患者的肾动脉环进行 blot分析观察 刺激，检测DMC对肾动脉的血管张力的影响，用Western 高血压患者肾动脉内NOX．2和NOX．4的表达，用免疫组织化学方法观察 NADPH氧化酶亚单位表达的改变，DHE荧光染色检测人肾动脉内活性氧 含量，研究DMC是否可以改善肾动脉血管内皮功能。 结果：DMC可以显著增加高血压患者肾动脉内皮依赖型减弱的舒张 II诱导的ROS 转由AngII诱导的NOX．2及NOX．4上调，显著抑制Ang 释放。 结论：DMC可通过抑制NADPH氧化酶改善高血压状态下肾动脉血 II诱导的血管功能障