去甲斑螯素对大鼠肝星状细胞增殖及凋亡的影响.pdfVIP

I|UII I Ill IIIII III II III ＼1901186 目 录 中文摘要…………………………………………………………………l 英文摘要…………………………………………………………………4 研究论文 去甲斑蝥素对大鼠肝星状细胞增殖与凋亡的影响 前言…………………………………………………………………8日lJ舌…………………………………………………………………8 材料与方法…………………………………………………………9 结果…………………………………………………………………17 附图………………………………………_………………………19 附表…………………………………………………………………26 讨论…………………………………………………………………30 结论…………………………………………………………………34 参考文献……………………………………………………………35 综述 线粒体途径与肝星状细胞凋亡…………………………j…．．39 致谢………………………………………………………………………50 个人简历………………．一………………………………_……………51 中文摘要 去甲斑蝥素对大鼠肝星状细胞增殖与凋亡的影响 摘 要 肝纤维化是肝脏对慢性损伤的一种修复反应，肝星状细胞(hepatic stellate 活化后很难将其由活化逆转为静息状态，主要通过诱导HSC凋亡可使其 数量减少，从而逆转肝纤维化。肝星状细胞已成为肝脏纤维化机制及抗肝 (cantharidin CA)是一种半帖烯毒素，是斑蝥抗肿瘤的有效成份；去甲 斑蝥素(NorcantharidinNCTD)是斑蝥素的衍生物，由马来酸与呋喃按 用，文献报道其能够延缓肾间质纤维化【4币】。但NCTD在肝脏纤维化的研 究，国内外尚未报道。本实验通过观察NCTD对大鼠的肝星状细胞形态、 增殖及凋亡的变化，探讨NCTD对肝星状细胞增殖、凋亡的影响及其可 能的机制，为今后NCTD在肝脏纤维化方面的治疗提供临床依据。 目的：本实验主要通过不同浓度的NCTD干预体外培养的大鼠肝星 状细胞，研究其对活化的肝星状细胞增殖、凋亡及周期的影响；以及对肝 membrane 星状细胞线粒体膜电位(mitochondrial Caspase3活性的影响。 方法：应用MTT法检测NCTD对活化的肝星状细胞增殖的影响； 变化；流式检测细胞凋亡率及周期；JC．1染色流式及激光共聚焦显微镜 检测细胞线粒体膜电位；酶标仪检测Caspase3酶活性。 结果：1NCTD对HSCs增殖的影响：MTT法检测细胞增殖显示， rtg／m1) 1、0．958+0．02、 0．633+0．02vs1．148+0．0 8士0．02、1．023+0．0 1，PO．05)，36h(1．23 中文摘要 O．697+0．02、O．567士0．01vs 义，不同时间对活化的肝星状细胞增殖有抑制作用，且存在一定的剂量与 作用明显增强。 2去甲斑蝥素对HSCs凋亡的影响： ①普通电子显微镜及Hoechest33342染色荧光显微镜下检测细胞凋亡形 1％士0．29％、18．08％士0．15％、25．45％0．5 凋亡率(5．3 1％)升高，与空白 对照组