去甲斑蝥素增强硼替佐米抗骨髓瘤效应的机制探究.pdfVIP

中文摘要 去甲斑蝥素增强硼替佐米抗骨髓瘤效应的机制研究 摘 要 目的：多发性骨髓瘤(Multiple 末期B细胞的恶性克隆性疾病，约占血液系统恶性疾病的10％，多发生 于60岁以上的老年患者，化疗耐受力差。目前常用的化疗方案有MP(马 法兰+强的松)、VAD(长春新碱、阿霉素及地塞米松)等，治疗有效率约 70％，但完全缓解率只有3．10％，中位总生存期仅3年左右。蛋白酶体抑 者硼替佐米治疗无效。提高硼替佐米的剂量可以提高疗效，但可引起严重 的副作用尤其是周围神经病变限制了其临床应用。 的两个甲基合成，对多种肿瘤细胞系，特别是消化系统肿瘤，有显著的抗 癌活性。我们的前期工作证实，去甲斑蝥素通过诱导细胞凋亡发挥抗骨髓 瘤效应，并能增强阿霉素的抗肿瘤效应。本实验旨在通过观察去甲斑蝥素 联合硼替佐米对骨髓瘤细胞增殖、凋亡以及核因子．v．B(NF．1(B)信号通路相 关基因及蛋白的影响，并观察其对荷瘤裸鼠肿瘤生长的抑制作用，初步探 讨其作用机理，为临床治疗多发性骨髓瘤提供新的思路。 方法： 1 细胞增殖的影响；等效应曲线法计算NCTD和BTZ联合的CI值，并绘制等 效曲线： 1．1 inhibitingconcentration，ic50)。 1．2 NCTD对BTZ的化疗增敏作用：将NCTD和BTZ按1000：l的比例共同 并IIBTZ联合的CI值，并绘制等效曲线。 中文摘要 NCTD+5nmol／LBTZ)。 以及联合组(5pmol／L blot法检测用药 3流式细胞术(FCM)分析凋亡细胞和细胞周期；Western ADPribose 前后多聚ADP．核糖聚合酶(Poly 解的PARP(CleavedPARP)的变化。 PCR方法检测核因子．KB 4采用RT-q P65(NF．1CB 和BaxmRNA的表达。 5 应用Westernblot法检测核因子．KB P65(NF．rBP65)、磷酸化NF．rob P65)、NF．KB抑制因子IKBa、磷酸化IKB P65(p．NF．KB 0【(p-IKBa)、 Survivin、Bcl．2和Bax蛋白的表达变化； 共4周)、BTZ(O．25mg／kg，1／周，共4N)*I--者联合(NCTD20mg／kg， 3次／周；BTZ O．25mg／kg，1／周，共4周)，钡lJ定裸鼠移植瘤瘤体积改变， 并绘制生长曲线。 结果： l 随药物浓度的增加而增加，呈现出剂量效应关系。而两药联合应用能 明两药具有协同作用。 2联合组相比BTZ单用组，细胞凋亡率明显增加：对照组、BTZ组 BTZ) (53．26+_4．86)％。Westernblot进一步证实了上述结论。细胞周期测定发 3 P65 BTZ单药组与联合组比较，NF．kB 至(0．294-0．04)，Survivin、Bcl一2 (5．664-0．44)。 4 BTZ单药组与联合组比较，U266细胞胞核NF．KB P65、胞浆P．NF．rd3 中文摘要 还可抑制U266细胞Ikl3a的磷酸化，进而促进胞浆bcBa的表达。 (0．914-0．18)31(0．56+0．10)降至(0．3 (O．78-4-0．10)升至(2．43+0．34、)。