急性一氧化碳中毒对血脑屏障通透性的作用.pdfVIP

目 录 一、摘要……………………………………………………………………1 (一)中文摘要…………………………………………………………l OBOO………………………………3 (二)英文摘要…………………BO ooo…5 二、正文…………………………………………………………Ooo (一)日U吾………”一””一””一””一””一””一”一一”“一“”…一”“‘5(一)前言……………………………………………………………5 OOOOOOOODOO……………………………6 (二)材料和方法……………O (三)结果……………………………………………………………lO (四)讨论……………………………………………………………13 OJOOOOOOOOOOOOOOO………………18 (五)结论……………………………O (六)参考文献………………………………………………………19 三、综述………………………………………………………?………··21 (一)综述…………………………………………………………2l oOoOooooD060OOOOOOOOOOO………………………………27 (二)参考文献…O 四、附录…………………………………………………………………29 五、致谢…………………………………………………………………32 急性一氧化碳中毒对血脑屏障通透性的影响 硕士生姓名： 姜聪 指导教师： 王苏平教授 指导小组： 王苏平教授 专业名称： 神经病学 摘要 目的：一氧化碳(Carbon 体，是有机化合物燃烧后所产生的一种副产品。大气中的CO浓度一般低于0．001 ％，CO与血红蛋白的亲和力是氧气与血红蛋白亲和力的200．250倍以上，因此当 CO中毒后，导致氧血红蛋白解离曲线的转变，由于竞争性抑制CO与血红蛋白结 合，减少氧气的输送，随后组织缺氧。CO可引起身体多系统损害，其中以脑损害 最易。本实验通过建立急性CO中毒动物模型，利用EB具有不能透过BBB的特 性，干湿重方法检测脑水肿含水量，通过对脑组织含水量和EB的测定来了解急性 CO中毒性脑水肿的时程变化以及BBB通透性改变的情况，采用免疫组化的方法 观察不同时间点小鼠内AQP4的表达情况，以了解AQP4表达对急性CO中毒性脑 水肿的作用及对BBB通透性的影响。 方法：1、健康雄性昆明小鼠84只，按照随机原则分为对照组(空气组)和 染毒组(急性CO中毒组)，染毒组按伤后时间顺序又分为6个亚组，即伤后6h、 测脑组织对EB的通透性，2只灌注取脑做免疫组化检测。2、参照单次腹腔注射 量注射空气。3、从每个亚组中随机选取2只小鼠，造模成功后按每个亚组的相应 时间点，称重后用10％水合氯醛麻醉后迅速断头处死，取脑组织行脑组织含水量 测定。4、从每个亚组随机选取2只小鼠，于相应时间点前2h经lO％水合氯醛3ml／kg 后断头取脑，用分光光度仪测定淬取液在EB溶液最大吸收峰处得光密度值，依据 建立的标准曲线得到淬取液的EB浓度，即可得到单位脑组织中的EB渗出量。5、 行AQP4免疫组织化学染色，观察细胞表达数目及蛋白表达变化。 结果：小鼠急性CO中毒后6小时脑组织含水量及EB渗出量开始增高，AQP4 蛋白的表达也开始增高，在48小时后脑组织含水量、EB渗出量及AQP4蛋白表 达量逐渐上升，3天后达到高峰，随后逐渐下降， (p0．05)有统计学意义。脑 2 Theeffectonbloodbrainbarrier