抗gremlin1单克隆抗体的制备及初步鉴定——一种有望成为检测子宫内膜异位症的新标记物.pdfVIP

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2017-09-06 发布于贵州
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抗gremlin1单克隆抗体的制备及初步鉴定——一种有望成为检测子宫内膜异位症的新标记物.pdf

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抗gremlin1单克隆抗体的制备及初步鉴定——一种有望成为检测子宫内膜异位症的新标记物

目录缩略语表………………………………………………………．3 中文摘要…………………………………………………………．．4 A BSTRACT……．．…………………．………………………………．．4 引言………………………………………………………………………．6 第1章抗GREMLIN1单克隆抗体的制备…………8 l l 材料…………。 l l l 标准品和化学试剂……………………………………………………………………………8 ll 2 实验动物及细胞株……………………………………………………………………………9 ll 3 实验溶液………………………………………………………………………………………9 l2 主要实验仪器………。 12 3 实验方法 13 3l 制备免疫原…………………………………………………………………………………一13 32 动物免疫……………………………………………………………………………………。l3 33 血清效价测定………………………………………………………………………………～14 34 细胞融合………………………………………………………………………………………．14 35 阳性细胞株筛选和克降化…………………………………………………………………。16 l：i 36 细胞株的冻存与复苏………………………………………………………………………一17 l37 单兜隆抗体的制备及纯化…………………………………………………………………．．17 l4 结果分析……………………………………………………………． …18 1 4l 血清效价测定…………………………………………………………………………………l8 1 42 杂交瘤细胞…………………………………………………………………………………．．19 l5 讨论………………………………………………………………………． 51 单克隆抗体的优势…………………………………………………………………………．．20 52 两种标准品作为免疫原的比较……………………………………………………………一21 i 53 l荦航的临昧应川………………………………………………………………22 抗舒emlin l6 结论抗GREMLIN 第2章 1单克隆抗体的初步鉴定……．24 2．1 材料…………． 24 2，1．1 符奉及纪≠况蒯…………………………………………………………………．．2彳 2．1．2 实验溶液……………………………………………………………………………………．．25 2．2 主要实验仪器 27 2．3 实验方法………………………． 27 2．3．1 单克隆抗体浓度的测定……………………………………………………………………一27 1 2．3．2 单克隆抗体效价的测定……………………………………………………………………．．28 2．3．3 细胞免疫荧光法鉴定单抗特异性…………………………………………………………一28 2．3．4 Westem blotting………………………………………………………………………………………………………．．29 2．4 结果匀·析……………………………………………………………………………………………………………30 2．4．1 腹水单抗浓度测定…………………………………………………………………………．．30 2．4．2 腹水单抗效价测定…………………………………………………………………………．．30 2．4．3 细胞