活化二价锌离子对碱烧伤后角膜融解病理机制中基质金属蛋白酶抑制作用的探究.pdfVIP

目录 缩写词表……………………………………………………………………．1 中文摘要……………………………………………………………………．2 英文摘要……………………………………………………………………．4 研究背景……………………………………………………………………．6 第一部分：角膜碱烧伤后不同时期主要作用基质金属蛋白酶的表达 前言…………………………………………………………………………………………………．．8日lJ舌…………………………………………………………………………………………………．．苍 材料与方法…………………………………………………………………．9 结果…………………………………………………………………………15 讨{仑…………………………………………………………………………………………………20 ／J、结…………………………………………………………………………………………………22 参考文献……………………………………………………………………23 第二部分：活化二价锌离子对碱烧伤后角膜融解病理机制中 基质金属蛋白酶抑制作用的研究 前言…………………………………………………………………………………………………26 刖舌…………………………………………………………………………………………………么。 材料与方法…………………………………………………………………27 结果…………………………………………………………………………32 讨{仑…………………………………………………………………………………………………35 小结…………………………………………………………………………37 参考文献……………………………………………………………………37 综j查…………………………………………………………………………………………………40 中国医学科学院北京协和医学院 缩略词表 1 中国医学科学院北京协和医学院 活化二价锌离子对碱烧伤后角膜融解病理机制中基质金属 蛋白酶抑制作用的研究 中文摘要 目的：探讨在碱烧伤后角膜融解损伤病理作用中不同时间内起主要组织损伤作用 的基质金属蛋白酶的类型；探讨活化Zn2+离子对碱烧伤后角膜融解损伤不同时期 异常高表达的基质金属蛋白酶的抑制作用。 方法：建立中度角膜碱烧伤小鼠实验动物模型，应用明胶酶谱、蛋白质印迹法以 及免疫组织化学技术检测碱烧伤后3日、1周以及1个月时角膜组织内基质金属 对碱烧伤后角膜组织进行局部干预。应用明胶酶谱以及蛋白质印迹法检测角膜碱 烧伤后3日及1周时不同浓度zn2+离子溶液实验亚组以及对照组角膜组织内中一1， 2及9的表达情况。 结果：应用明胶酶谱方法观察到碱烧伤后3日角膜组织内基质金属蛋白酶一9表 达显著的升高，呈现高水平表达，碱烧伤后l周其表达量显著下降，而碱烧伤后 1个月时角膜组织内观察不到基质金属蛋白酶一9的表达。基质金属蛋白酶一2与 之相反，在碱烧伤后3日角膜组织内仅呈现低水平表达，碱烧伤后1周其角膜组 织内表达量显著升高，呈现高水平表达，碱烧伤后1个月时其表达量再次降低， 呈现中度水平表达。应用蛋白质印迹法以及免疫组织化学方法观察的碱烧伤后3 曰、l周及1个月组织内基质金属蛋白酶一9及2的表达变化情况与应用明胶酶谱 方法观察的情况相符，即：基质金属蛋白酶一9在碱烧伤后急性期高表达，且其 高表达主要位于靠近角膜上皮层区域，而后表达量逐渐降低；基质金属蛋白酶一2 在碱烧伤后急性期表达水平较低，而在碱烧伤后1周呈现高水平表达，不同于基 质金属蛋白酶一9，其高表达分布于角膜基质内，其后表达量再次降低，呈现中度 水平表达。应用蛋白质印迹法以及免疫组织化学方法观察到碱烧伤后组织内不同 时期基质金属蛋白酶一1在角膜碱烧伤后组织内的表达变化趋势与基质金属蛋白 酶-2相似，在碱烧伤后l周时表达水平最高，其后表达量下降，但其各时期表 达量普遍较低。另一方面，研究通过明胶酶谱以及蛋白质印迹法观察到应用活化 Zn2+离子干预的实验组较对照组角膜组织在碱烧伤后3日对高水平表达的基质金 中国医学科学院北京协和医学院 属蛋白酶一9以及碱烧伤后1周对呈现最高峰表达的基质金