淋巴瘤细胞系SNK-6及Hut-78的体外药敏实验及多药耐药基因检测.pdfVIP

摘要 基因检测 硕士研究生 张喜爱 导 师 张明智教授 郑州大学第一附属医院肿瘤科 中国河南郑州450052 摘要 背景和目的 T细胞淋巴瘤是一类来源于T淋巴细胞的恶性克隆增殖性疾病，是亚洲国家 比较常见的淋巴瘤类型。其中，外周T细胞淋巴瘤如结外鼻型NK／T细胞淋巴瘤、 皮肤T细胞淋巴瘤具有高度侵袭性，病程进展快，生存期短，预后较差等特点， 对我国人民的健康和生命构成了严重威胁。化学治疗是目前治疗淋巴造血系统 肿瘤的常用手段，但对于T细胞淋巴瘤的治疗尚缺乏理想的治疗方案，大多参考 B细胞淋巴瘤的治疗方案，常规应用的CHOP方案化疗效果欠佳，且容易复发， 另外，盲目的化疗往往因药物选择性不佳，造成毒副作用较大，治愈率较低。 因此，对T细胞淋巴瘤进行药物敏感筛选以寻找有效的治疗方法，提高治疗有效 率，具有重要的临床意义。 ． 耐药性发生是肿瘤治疗失败与复发的主要原因之一。多药耐药的根本原因 是多药耐药基因mdr-I表达升高，T细胞淋巴瘤对化疗疗效欠佳，可能与肿瘤细 于相应T细胞淋巴瘤患者的细胞株，它1『l]mdr-I表达情况与化疗疗效是否有一定 关系，值得进一步研究。 本课题以人NK／T细胞淋巴瘤细胞SNK-6和人皮肤T细胞淋巴瘤细胞 Hut．78为实验对象，以细胞抑制率、半数抑制浓度即IC50值为实验指标，检测 摘要 基因的表达情况，对mdr-1表达与T细胞淋巴瘤化疗疗效之间的关系进行初步 探讨。以期研究结果可以为此型淋巴瘤的临床治疗提供一定的理论依据。 方法 二氧化碳培养箱中进行培养。待细胞生长至对数期时，收集细胞，通过MTT法 检测经不同浓度化疗药物处理后的SNK-6和Hut．78细胞的抑制率，并且利用统 计学软件计算出不同药物各自的IC50值，从而比较不同化疗药物的敏感性大小。 mRNA表达情况。 复士里 ：口刁≮ 1．对于同一种细胞来说，在不同药物浓度的作用下，根据IC50值大小： SNK．6的体外药物的敏感性顺序依次为吉西他滨长春新碱多西他赛依托 泊苷顺铂氟尿嘧啶阿霉素甲氨蝶呤门冬酰胺酶氟达拉滨阿糖胞 苷；Hut一78的体外药物敏感性顺序依次为吉西他滨长春新碱顺铂阿霉素 甲氨蝶呤依托泊苷多西他赛氟达拉滨阿糖胞苷氟尿嘧啶门冬酰胺 酶。 2．对于同一种药物来说，分别作用于不同的细胞，根据IC50值大小，其体 外药物敏感性也存在一定差异。吉西他滨、长春新碱对SNK-6和Hut-78细胞均有 较强的抑制作用，为高度敏感药物，组间比较差异无显著性(PO．05)。顺铂、 依托泊苷、甲氨蝶呤、阿霉素这些药物对于SNK．6和Hut．78细胞均属中度敏感药 物，组间比较差异无显著性(尸O．05)。多西他赛、门冬酰胺酶、氟尿嘧啶体外 胞苷对于SNK-6和Hut．78细胞均为低度敏感或不敏感药物，组间比较差异有显著 性(尸0．05)。地塞米松对SNK-6和Hut．78细胞无明显体外抑制作用。 Ⅱ 摘要 结论 1．不同化疗药物对两种T细胞淋巴瘤细胞系作用效果不同，有高、中、低敏 感度之分；两种T细胞淋巴瘤细胞系对化疗药物的敏感性也存在一定差异，部分 药物敏感性差异较大。 疗效有一定关系。 关键词：T细胞淋巴瘤；药敏；MTT；RT-PCR；mdr-1 III of Sensitivityexperiment ChemotherapeuticDrug and