淋巴细胞膜上Na+Ca2+交换操纵的Eu 3+内流的荧光法研究.pdfVIP

维普资讯 第6期 无 机 化 学 学 报 V0L18．NO．6 2002年 6月 CHINESEJOURNALOFlNORGANICCHEMISTRy Jun．2002 淋巴细胞膜上 Na ／Ca 交换操纵的Eu 内流的荧光法研究 魏春英 扬 频 (山西大学分子科学研究所，太原 030006) 利用 Fura-2荧光浓度指示剂法、通过检测 360nm激发荧光强度的变化，研究了E 能否利用人外周血淋巴细胞膜上的 Na+／c +交换进入细胞。结果表 明：用 如abain预处理细胞无 Na介质中测试，当加入 Eu¨时，36Ohm荧光强度发生猝灭，且随 着胞外加入的Eu，+浓度的增大而猝灭增强。表明在实验条件下 E 可以进^细胞。电压依赖性 cⅡ 通道阻断荆 nicardipine对 Eu]+的进入无显著影响．建议了N ／Ca：+交换是 Eu]进人细胞 的主要途径。当加人不 同浓度的Eu]和 C 的混和组分时，在 无Na+介质中测试．结果表明Eu 与Ca2竞‘争 Na ／Ca 交换位点。在模拟胞 内离子组分的EGTA缓冲液中 p《H705)，谢得 E ·与 Fura一2的离解常数为495×10 trlol-L一。 美键词 淋巴细胞 Na ／Ca¨交换 稀土离子 分类号 0614 1 稀土在农业 、医药和畜牧业等许多领域已得到 入牛的嗜铬细胞，但 当胞外 L 大于 lmmol·L 广泛的应用，尤其在中国，稀土微肥已被应用累计面 时．La3阻止 Na ／C ’交换 191．．Sreekumar等人得出 积达6亿亩 。然而稀土离子是否能跨膜进入细胞并 La“能进人人的Keratinocytes细胞，同时抑制Ca2 参与动植物的代谢，稀土的生物效应及其对人类的 内流和外流，但进入机制尚不清楚” ；Izumi等研究 长期毒理影响仍不清楚 1。在分子水乎上，认识细胞 者认 为在 高 K 介 质 中 La”进入兔子 的 Melam． 和稀土离子的作用机制，它们的跨膜行为及其作用 otrophst”；Kwan得 出LaJ设有进入泪腺泡细胞， 的靶分子．是理解稀土生物效应 的基础。近几年来， 而且抑制 thapsiggargin激活的ca’的进入 “；‘另外， 国内许多研究工作者开展了大量实验研究：倪嘉缵 Segal的研 究认 为，低 浓度 的 L (10～30~mol- 研究组利用高灵敏 的 ICP-MS及 NMR技术研究了 L )促进 ca 进入兔子的thymocytes，但高浓度的 稀土离子和红细胞 的作用并得出稀土离子不能进入 LaJ’(01—1Ommol-L )却阻止 Ca 的进入 l【1。总 红细胞 I的结论；但王夔研究组应用破碎细胞法、激 之，稀土跨膜的研究结果，随方法 的不同和细胞种 光扫描法研究指出，稀土离子能进入红细胞，且其 类的不匣I有明显差别，而且不同细胞跨膜机制也大 跨膜与稀土离子在膜上的打洞作用有关 ”0；我所 曾 不相 同，且稀土离子对 Ca’的流人和流出也有影 利用 Fura-2检测 L 等稀土离子跨小 鼠骨髓瘤细 响。另外对其它稀土离子 的研究尚少见报道。为此。 胞 I、淋巴细胞 Ij_及豚 鼠心肌细胞膜 ”I的行为，并 我们在 已有 的淋 巴细胞跨膜研究基础上 ．通过 系统地研究了在静息状态 、细胞膜表面去极化 、刺激 Na’／Ca“交换机制研究了Eu 跨淋 巴细胞膜 的行 剂作用以及钙通道开放及关闭的实验条件下的稀土 为，并初：步探讨了Eu 进入细胞 的机制。 离子跨膜行为，得出稀土离子不能通过正常活细胞