单核细胞向淋巴管内皮细胞转分化潜能探究.docVIP

单核细胞向淋巴管内皮细胞转分化潜能探究摘 要：传统的观点认为，单核细胞仅是吞噬细胞的前体细胞，在体内不同环境下能分化为巨噬细胞、树突状细胞、Kupffer细胞、小胶质细胞。但近几年的研究发现，单核细胞经诱导具有多向性的分化潜能。本文将单核细胞向淋巴管内皮细胞转分化潜能的研究现状进行综述。 关键词：单核细胞；淋巴管内皮细胞；转分化。 干细胞替代治疗是近些年来医学研究领域的热点。单核细胞参与血管新生一直是近些年来非常活跃的课题。研究发现，单核细胞能受组织环境影响、发生不同方向的分化。单核细胞不仅是巨噬细胞、树突状细胞的前体细胞，还能在特殊环境下分化成内皮祖细胞（Endothelial progenitor cell， EPCs）[1]，参与血管新生。然而，单核细胞参与淋巴管新生的研究相对较少。相对于血管内皮标志物，淋巴管内皮特异性标志物发现较晚，在1984年以后才陆续被发现[2]，因此对于淋巴管内皮的研究一直滞后于血管内皮。近年来，随着研究者对于一些淋巴管内皮特异性标志物的发现，关于淋巴管在诸多领域的研究均有所突破。因此，随着单核细胞向血管内皮细胞转分化的研究的深入，单核细胞向淋巴管内皮细胞转分化的研究已经有了初步进展，但至今仍未有定论。目前这方面的研究，只能给单核细胞向淋巴管内皮细胞转分化的可能性提供一些依据。 一、单核细胞向血管内皮细胞的转分化 从胚胎发育学看，淋巴管内皮细胞与血管内皮细胞具有同源性。胚胎主静脉的一部分内皮细胞出芽形成淋巴囊，再由淋巴囊出芽形成成熟的淋巴管网络[3]。所以，单核细胞向血管内皮细胞转分化的研究，能提示单核细胞向淋巴管内皮细胞转分化的可能性。 研究发现，从人类血中分离培养CD34-CD14+单核细胞，表达特异性内皮细胞表面标志物的细胞的比例随时间推移增加，到第4周时，表达vWF、VE-cadherin和e-NOS的细胞比例分别达到94.2%，89.7%和58.8%，在三维基质胶中，这些细胞形成了条索状或管状结构，表明这些细胞聚集可能是参加血管生成的[4]。由于单核细胞数量多，其在治疗缺血性疾病领域的应用前景备受关注。 二、单核细胞的多向性干细胞分化潜能 有研究报道，单核细胞经诱导具有多向性干细胞分化潜能。Zhao等的研究表明，人外周血单核细胞在粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）的作用下，能被诱导成多潜能干细胞，后者经过诱导能分化成巨噬细胞、T淋巴细胞、上皮细胞、内皮细胞、神经元细胞、肝细胞[5]。Kuwana等的研究小组发现，人外周血单核细胞在纤维连接蛋白（fibronectin，FN）、L-DMEM以及外周血CD14―单个核细胞上清（即淋巴细胞上清）的某些细胞因子诱导作用下，能分化成具有成纤维细胞形态并且表达CD34的多潜能细胞，命名为MOMCs，这种细胞仍然携带单核细胞抗原CD14和白细胞共同抗原CD45，因此来源于单核细胞；他们在MOMCs的培养体系中分别加入相关的刺激因子，对MOMCs进行诱导，发现会有不同数量的细胞群向相应的方向分化，如成骨细胞、肌细胞、软骨细胞、脂肪细胞[6]。在2007年，Kuwana等人又在StemCell上发表论文[7]，专门研究了MOMCs向内皮细胞分化的潜能。培养7d后，发现在蛋白和基因水平，细胞均表达内皮细胞特异性标志物，如CD144、CD34、vWF、VEGFR-2等，且与脐静脉内皮的表达水平相近， RT-PCR结果显示细胞对于CD14、CD45的表达明显下调。 上述研究中，无论是单核细胞来源的EPCs、还是MOMCs，均只关注了其向血管内皮细胞分化，及其用于血管新生、缺血性疾病治疗的效果，尚未见单核细胞来源的EPCs或MOMCs向淋巴管内皮细胞诱导分化的研究报道。 三、单核细胞参与淋巴管新生 炎症、肿瘤或免疫排斥反应时，局部组织会出现单核-巨噬细胞浸润。研究者发现单核-巨噬细胞浸润与淋巴管新生有关。肿瘤淋巴转移的研究发现，肿瘤周围有巨噬细胞浸润且高表达VEGF-C（称为肿瘤相关巨噬细胞），其数量与周围淋巴管密度及淋巴转移明显相关，甚至发现淋巴管壁有巨噬细胞的掺入[8，9]。肾移植后免疫排斥反应的研究发现，移植肾的淋巴管密度比正常肾增加了约50倍，观察到淋巴管附近出现结节样单个核细胞浸润，淋巴管内含有淋巴细胞[10]。有研究表明，在野生型鼠伤口急性期形成的淋巴管，大部分是由巨噬细胞标志物F4/80和淋巴管标志物LYVE-1 和 Podoplanin共同阳性的细胞构成；在纯合子糖尿病鼠，由于巨噬细胞的数量和活性均降低，角膜伤口愈合中，与对照组杂合子鼠相比，LYVE-1+淋巴管和CD31+血管明显减少[11]。Maruyama等通过建立鼠的角膜移植模型，发现CD11b+的巨噬细胞浸润区有淋巴管新生，认为新生的淋巴管