4-1BB4-1BBL在不同胃癌细胞株中表达的探究.pdfVIP

中文摘要 4-1BB／4．1BBL在不同胃癌细胞株中表达 的研究 摘 要 目的：胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，虽然目前 对胃癌采取了多手段的综合治疗，且生存率较以往有所提 高，但仍无大的治疗突破。其难以治愈的原因之一与肿瘤的 免疫逃逸有关。人体的抗肿瘤免疫是以T细胞介导的细胞免 疫为主，T细胞的活化需双信号刺激：第一信号由T细胞抗 合物结合提供，第二信号由APC上的共刺激分子与T细胞 上的相应配体提供，只有双信号共同刺激才能有效激活特异 性的T细胞，完成细胞免疫，消灭肿瘤细胞。大量研究证实 肿瘤细胞可通过缺乏共刺激分子的方式逃避机体免疫。 同刺激信号，在免疫应答、肿瘤免疫和自身免疫性疾病中起 重要作用。4—1BB主要表达于活化的T细胞表面，主要以 CD8+T细胞为主，亦可表达于单核细胞，粒细胞及树突状(DC) 等细胞上。4．1BB分子还诱导表达在T细胞性肿瘤细胞株 上，在肝癌细胞和上皮细胞等非淋巴细胞上也有一定的表 达于活化的B细胞和T细胞、单核细胞、树突状细胞(DC)、 神经母细胞瘤细胞及一些肿瘤细胞上。4．1BB／4．1BBL在细 胞间相互作用、细胞粘附、抗原递呈、T细胞共刺激以及信 号传导中起不同的作用。4．1BB和其配体4．1BBL介导的共 中文摘要 刺激信号是激发有效的抗肿瘤细胞免疫应答尤其是长期抗 肿瘤效应所必需的，有望为肿瘤生物治疗开拓新的途径。 本研究采用RT-PCR测定四种不同分化程度的人胃癌细 测定人淋巴细胞对上述四种人胃癌细胞株的体外杀伤活性， 同时ELISA法检测人淋巴细胞与胃癌细胞共培养的上清液 4．1BB／4．1BBL共刺激信号的表达与胃癌免疫之间的关系， 进一步探讨肿瘤的免疫逃逸机制，旨在为临床对胃癌的免疫 治疗奠定理论和实验基础。 方法：选取四种不同分化程度的人胃癌细胞株 象。采用逆转录．聚合酶链式反应(reverse chain polymerase 4．1BB、4．1BBL mRNA表达；采用免疫细胞化学方法测定人 不同时间段、不同效靶比时人淋巴细胞对上述四种人胃癌细 linked 胞的杀伤活性；采用酶联免疫吸附实验(Enzyme immunosorbent 1 化。所有实验数据用SPSS6．0统计软件处理，P0．05时认 为差异具有显著性。 结果： 中文摘要 中4．1BB的mRNA表达：． bp 的特异性条带。用凝胶成像系统进行半定量分析显示，4．1BB 的mRNA表达水平从高到低依次为： MGC．803(77．30％)、 中4．1BBL的mRNA表达： bp 的特异性条带。用凝胶成像系统进行半定量分析显示， 1(37．1 (46．63％)、SGC-790 (14．14％)。 中4．1BB的蛋白表达： 免疫细胞化学法示四种胃癌细胞株(BGC．823、 阳性表达。4．1BB着色程度由深到浅依次为：MGC．803、 BGC．823、SGC．7901、MKN．28。 中4．1BBL的蛋白表达： 免疫细胞化学法示四种胃癌细胞株(BGC．823、 MKN．28、 阳性表达。4．1BBL着色程度由深到浅依次为： SGC．7901、BGC．823、MGC．803。 5 MTT法检测人淋巴细胞对胃癌细胞的体外杀伤活性： 24