真核生物转录的基本过程.pptVIP

第二节 真核生物转录 一 真核生物转录酶及相关因子 （一）真核生物的RNA聚合酶 三种RNA聚合酶Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,它们专一地转录不同的基因,其转录过程和产物已各不相同.三种RNA聚合酶对鹅膏覃碱的敏感性反应不同. (二)RNA聚合酶Ⅱ的启动子 1、核心启动子 ●定义：指保证RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必需的、最少的DNA序列，包括转录起始位点及转录起始位点上游TATA区 2、上游启动子元件 ●包括CAAT盒（CCAAT）和GC盒（GGGCGG）等 SV40 早期启动子 组蛋白H2B 增强子的性质 1 增强效应十分明显:10---200倍,甚至上千倍 2 增强效应与其位置和取向无关 3 大多为重复序列,其内部常有一个核心序列TGGAAA 4 其增强效应有严密的组织性和细胞特异性,只有特定的转录因子参与才能发挥其功能 5 没有基因专一性,与不同的基因组合均表现增强效应 6 许多增强子还受外部金属离子等调控 转录起始 转录延伸 转录终止 转录起始：转录因子和RNApolⅡ按照一定的次序，通过招募的方式形成预转录起始复合物（pre-initiation complex）的过程。 ＴＦⅡ Ａ、Ｂ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、H　 转录因子 转录复合体 TBP TAFs TFIIA TFIIB TFIIF Pol II TFIIE RNA pol Ⅱ的转录起始 真核生物和原核生物转录的差别 三 真核生物RNA的成熟 （一）、mRNA的的成熟 （二）、tRNA的成熟 （三）、rRNA的成熟 （四）、RNA编辑 真核细胞mRNA的加工 帽子结构 帽子0:m7GpppX,N7甲基鸟嘌呤核苷酸 帽子1:m7GpppXm,帽子0后第一个核苷酸2位氧甲基化,这是除单细胞真核生物外其它真核生物的主要帽子形式 帽子2:m7GpppXmpYm,帽子0后第二个核苷酸2位氧甲基化 帽子结构中甲基供体为S-腺苷甲硫氨酸(SAM) 帽子结构的生理功能 1 帽子结构为核糖体识别mRNA提供了信号,帽子0结构是核糖体识别mRNA所必须的. 2 帽子结构增加mRNA的稳定性,保护mRNA免受5’外切核酸酶的降解. 3 帽子结构还能有助于成熟的mRNA的转运 有助于前体RNA的正确拼接 3’端加尾 多聚腺苷酸尾的功能 提高RNA的稳定性 增强RNA的翻译效率 影响最后一个内含子的切除 通过选择性加尾调节基因的表达 创造终止密码子 剪接信号 哺乳动物 5’--/GUAAGU--INTRON--YNCURAC--YnNAG/G--3’ 酵母 5’--/GUAUGU--INTRON--UACUAAC--YAG/G--3’ 小分子核内RNA(snRNA) 真核细胞核内一组小分子RNA,含70~300碱基,序列中尿嘧啶含量较高,因此又用U命名. 既非任何RNA的前体,也非某种RNA代谢的中间产物,而是具有独特功能且独立存在的实体,参与mRNA的加工。 常与多种特异的蛋白质结合在一起，形成小核糖体核蛋白（small nuclear ribonucleoprotein particle，snRNP） 剪接体 内含子的其它剪接方式及功能 内含子的分类 第一类内含子 需要鸟苷或鸟苷酸为 辅助因子，实行自我催化 第二类内含子 无需辅助因子，可自我拼接 第三类内含子 套索状剪接 SnRNA和SnRNP完成 第四类内含子 tRNA基因及其初级转录产物的内含子，需要多种蛋白质的催化 Ⅰ类内含子的自我剪接 切除部分序列: 5′-端 一段前导序列 　 反密码子环 一段插入序列 3′-端CCA-OH的生成 tRNA核苷酸基转移酶 某些碱基的化学修饰: 甲基化 还原反应 DHU 脱氨反应 四 RNA的编辑 编辑（editing）是指在mRNA水平，通过核苷酸的缺失，插入或替换而改变遗传信息的过程。 RNA编辑的不同类型和分布 转录延长 真核生物转录延长过程与原核生物大致相似，但因有核膜相隔，没有转录与翻译同步的现象。 RNA-pol前移处处都遇上核小体。 只有核小体的构象发生某种有利于转录的变化，如核小体临时解体或重塑，，参与转录的酶和蛋白质才能识别启动子和模板，转录才能顺利进行。 DNA 核 核糖体 新生蛋白质 真核生物 原核生物 mRNA前体 转运 加工 mRNA mRNA ? RNA聚合酶不相同 ? 启动子不同 ? 转录后RNA加工修饰不同 ? 是否需要转录因子 5′ “帽子”